与目的基因相关的文献报道

基因分离克隆的方法

1基因芯片技术分离目的基因　　生物芯片是高密度固定在固相支持介质上的生物信息分子的微列阵。列阵中每个分子的序列及位置都是已知的，并按预先设定好的顺序点阵。基因芯片是生物芯片的一种，其上固定的是核算类物...

第四节　目的基因序列的来源和分离

第四节　目的基因序列的来源和分离　　一、基因组DNA文库　　从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当...

第六节　目的基因序列克隆的筛选与鉴定

第六节　目的基因序列克隆的筛选与鉴定　　目的序列与载体DNA正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的，因而最后生长繁殖出来的细胞并不同都带有目的序列。一般一个载体只携带某一段外源DNA，一个细胞只接...

分子生物学名词解释荟萃

...控机制)。14.DNA的体外重组：DNA的体外重组是指含有特异目的基因的DNA片段与载体DNA在试管内连接的过程。常用的方法：1.粘性末端连接法；2.平末端连接法；3.结尾法；4.人工接头法（linker）。15.限制性核酸内切酶（restrictionendonuc...

人疱疹病毒6型101K被膜蛋白主要抗原决定簇区原核表达克隆的构建和表达

...测序，与GenBank中HHV6标准毒株序列比较以进一步鉴定。目的基因及表达载体pThioHisA分别经双酶切后连接，转化宿主菌E.coliBL21，应用PCR法及限制性核酸内切酶双重鉴定原核表达质粒，并经测序证实。IPTG诱导蛋白表达，SDSPAGE电...

中国研究者探讨了石蜡包埋口腔白斑组织检测目的基因的方法

...者探索了在石蜡包埋的口腔白斑组织中高效、快捷地检测目的基因的方法。研究者采用25例10％福尔马林固定、石蜡包埋的口腔白斑组织，比较显微解剖-巢式PCR法、蛋白酶K消化-PCR法与传统酚氯仿抽提-PCR法3种方法，检测共济失调...

中国研究者探讨了石蜡包埋口腔白斑组织检测目的基因的方法

...者探索了在石蜡包埋的口腔白斑组织中高效、快捷地检测目的基因的方法。研究者采用25例10％福尔马林固定、石蜡包埋的口腔白斑组织，比较显微解剖-巢式PCR法、蛋白酶K消化-PCR法与作者：

西医外科第6版教材新增知识点

...引物。（3）常用PCR技术利用PCR技术，在适当条件下扩增目的基因，然后分析PCR产物，便可判断其是否为致病基因及其变异性质。PCR技术具有快速、灵敏、特异性高等特点，为扩大其应用范围，根据需要目前已衍行和发展出以下...

分子生物学实验基础知识

...子结构完全相同的基因。使需要分析研究的微量、混杂的目的基因易于纯化，得以增量，便于分析。　　外来基因引起细胞生物性状改变的过程叫转化（transformation），以噬菌体把外源基因导入细菌的过程叫转染（transfection）。...

第二节　分子生物学实验基础

...子结构完全相同的基因。使需要分析研究的微量、混杂的目的基因易于纯化，得以增量，便于分析。　　外来基因引起细胞生物性状改变的过程叫转化（transformation），以噬菌体把外源基因导入细菌的过程叫转染（transfection）。...

基因治疗技术与组织修复的基因治疗

...考虑，进行基因治疗有两种方法，一是体内法，即将载有目的基因的载体直接注入受损创面，从而将目的基因整合到基因组上，提高生长因子等促创面愈合因子的分泌。然而该方法具有一些明显的不足，首先是被转染的细胞特异...

一种构建人工miRNA载体的新策略

...要获得该基因的功能缺失突变体或者通过RNAi技术抑制该目的基因的表达。由于目前公用突变体库只有少量模式植物的突变体，因此通过RNAi技术来抑制目的基因的表达水平来探讨该基因的生物学功能，是反向遗传学研究常用的关...

阴茎勃起功能障碍的基因治疗

...Western和Southernblotting印迹技术及多聚酶链反应（PCR），使目的基因及基因产物能够被识别、分离、测系、合成、克隆及体外表达，从而准确地推测出单个基因在细胞内所起的作用。虽然阳萎是否存在遗传学缺陷缺乏足够证据，但...

版纳园研究揭示一种构建人工miRNA载体的新策略

...要获得该基因的功能缺失突变体或者通过RNAi技术抑制该目的基因的表达。由于目前公用突变体库只有少量模式植物的突变体，因此通过RNAi技术来抑制目的基因的表达水平来探讨该基因的生物学功能，是反向遗传学研究常用的关...

受体介导基因转移的策略研究与进展

...关键词受体介导；基因转移　　受体介导的基因转移是将目的基因与配体连接，通过配体与细胞表面的特异性受体结合，以受体介导的内吞作用将目的基因转入细胞。配体与受体的特异性结合以及受体介导的内吞作用是一种生理...

基因工程技术在制药领域的应用前景及产业化趋势

...一是取得符合人们的要求的DNA片段，这种DNA片段被称为“目的基因”；二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组DNA（质粒和病毒DNA称作载体）；三是把重组DNA引入某种细胞（称为受体细胞）；四是把目的基因能表达的受体细胞...

恶性肿瘤的基因治疗

...病率，患恶性肿瘤的人数远多于遗传病的患者。　　外源目的基因的选择不局限于有缺陷的或病变的基因，只要能达到治疗肿瘤的目的而对正常体细胞无害的基因均可以采用，外源目的基因的选择余地增大。　　肿瘤的基因治疗...

菌落PCR和质粒PCR对转化菌的筛选

...(LacZfor和LacZback)，用克隆载体转染菌的筛选与鉴定。采用目的基因5‘端和3‘端特异性引物，用于表达载体转染菌的筛选和鉴定。并将9株抗不同抗原单克隆抗体可变区基因120个阳性质粒PCR和菌落PCR产物作为DNA测序模板，进行自动...

第三节　基因治疗

...常基因或有治疗作用的核酸片段。选择高效的载体系统与目的基因重组。选择适当的受体细胞，接受正常基因并回输到患者体内适度表达，发挥特定的治疗作用。　　反义技术基因治疗是利用反义核酸细胞作用，导入细胞内抑制...

逆转录病毒载体介导的人白细胞介素10在大鼠心肌细胞的表达

...性培养基培养；3d后取细胞分别提取DNA和RNA。　　1.2.3　目的基因hIL-10在大鼠心肌细胞表达的检测　　1.2.3.1　目的基因hIL-10转移至大鼠心肌细胞的检测　取上述转染的大鼠心肌细胞，PBS离心洗涤3次，按文献［8］的方法提取DNA作PC...

第五节　变异在医学中的实际应用

...遗传工程方面的应用　　遗传工程的目的是人工对所需的目的基因进行分离剪裁，然后将目的基因与载体结合后，导入宿主细胞或细菌进行扩增获得大量的目的基因，或通过宿主表达获得所需的基因产物。质粒与噬菌体都是较理...

重组狂犬病毒在原核细胞中的表达

...他试剂购于华美生物工程公司。　　1.2　方法　　1.2.1　目的基因克隆及重组　以狂犬病毒全基因及IL-2全基因文库设计特异性引物，以狂犬病毒cDNA和IL-2cDNA为模板，经PCR扩增，调出目的基因，于T载体中克隆，获得足够量基因片...

腮腺炎病毒疫苗株与野毒株的部分核苷酸序列分析

...PCR产物进行测序。结果　传代之前第5代的两种疫苗株的目的基因的核苷酸序列完全一致;传至第25代的S79株的目的基因的核苷酸序列比25代的JerylLynn株显示了更高的突变率。比较现行疫苗株与野毒株的核苷酸序列后发现，1995年分...

人基因治疗研究和制剂质量控制技术指导原则

...（一）DNA重组体或基因导入系统的构建　　1．治疗用的目的基因　　详细说明基因治疗所用的目的基因及其来源（尤其是有否涉及国内外专利问题，应有专利查询资料），获得目的基因的材料方法和基因鉴定结果。　　2．载体...

第八节　DNA重组及基因工程技术对医学和生命科学发展的贡献

...　　近年来转基因动物技术又有新的发展。ES细胞导入与目的基因同源的序列，则在体内可以经同源重组使用的基因发生突变，这样成长起来的动物有目的基因的缺陷，这种技术称为基因打靶（genetargetting）。用基因打靶可以在...

葡萄糖激酶基因重组逆转录病毒的构建及鉴定

...GK基因逆转录病毒表达载体PLX-GK，经酶切及序列分析证实目的基因插入位点和读码框架正确、无突变;建立了稳定产毒细胞系PA317/GK，其培养上清平均病毒滴度为6.8×105cfu/ml，最高为1.8×106cfu/ml，PCR及免疫组化证实GK基因整合入PA317/G...

基因治创伤性骨关节病前景看好

...骨关节病，是国际上的一个研究热点。这种治疗是将相关目的基因转移到关节滑膜或软骨细胞中，从而抑制软骨损坏、增加软骨合成。对目的基因的选择和表达调控以及对“运送”目的基因的载体的研究都还有待进一步深入。　...

钩端螺旋体Lipl21基因真核质粒构建及在HeLa细胞的表达

...重组体pcDNA3.1（+）/LipL21转染入HeLa细胞，免疫组化法观察目的基因的表达。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建LipL21真核表达重组体pcDNA3.1（+）/LipL21，DNA测序显示重组质粒含有561bp的目的基因片段，读码框架正确，无碱基错配及...

转基因天山雪莲新品种实现快速大量获取

...特的优势。此次研究人员发明的分子育种方法，是将携带目的基因的表达载体转化农杆菌，将此农杆菌与通过植物组织培养技术培养的天山雪莲外植体共培养，使目的基因插入到外植体基因组中，经抗性素筛选，再通过分子检测...

第二节　基因治疗

...正或置换致病基因的一种治疗方法。在这种治疗方法中，目的基因被导入到靶细胞（targetcells）内，他们或与宿主细胞（hostcell）染色体整合成为宿主遗传物质的一部分，或不与染色体整合而位于染色体外，但都能在细胞中得到...