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一种简易的外周血提取DNA的方法
从外周血中提取DNA,进行核酸水平的研究是临床分子生物学重要的研究手段[1~3]。在肿瘤学研究中,可以利用外周血作对照检测肿瘤组织DNA差异,开展PCR,甲基化,基因突变等多项指标的检测。然而,传统的外周血DNA的分离...
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第四节 基因的转称与重组
...间发生遗传物质的转移和重组而实现.在基因转移中,提供DNA的细菌为供体,而接受DNA的细菌是受体。基因转移后获得重组的子代,即具有供体与受体菌二者的主要特性。实现基因转移需要两个基本条件:一是全部或部分供体菌的基...
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抗DNA酶B在风湿热流行病学研究中的应用
...状况简便的方法。方法 对广东216名城乡学龄儿童血清抗DNA酶B和抗链球菌溶血素“O”(ASO)水平进行为期1年的动态观察;另外在5个不同地区中,各抽取100名学龄儿童在同一季节进行抗DNA酶B水平横贯面的调查,结果与同期风湿热/...
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难检DNA样品分型检测新进展
在法医DNA检验中,STR(短串联重复序列)技术已经广泛用于个人识别和亲权鉴定方面。但低拷贝数量的DNA和/或高降解的DNA样本(难检DNA样本)的STR分型仍是法医学DNA检验的难题。扩增前引物延伸(IPEP)、全基因组扩增和MiniSTR(在...
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金黄色葡萄球菌DNA提取方法的探讨
金黄色葡萄球菌DNA一般采用经典溶菌酶、酚、氯仿提取法,但获得的DNA量不多,参照文献[1]的方法,经过我们多次的实验,发现以制备DNA的方法可取。 1材料和方法 1.1菌株来源本实验室分离到的细菌,经形态学、染色...
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Perlegen收集3000多DNA样本寻找药物副作用基因
...3000多位使用Actos(R)或Avandia(R)进行治疗的患者身上收集了DNA样本。Perlegen将使用这些样本来识别基因变体,这些基因变体可能导致病人遭受不良反应。这些分析可能有助於直接指导病人使用最适合他们的药物,可能为研究人士提供...
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质粒消除现象的研究现状与意义
...立复制能力的对细菌生存非必需的小型共价闭合环状双链DNA分子,其上携带着的耐药基因赋予了细菌对某些抗生素的耐药,广泛存在于革兰阳性和阴性菌中,几乎所有致病菌皆有之。耐药质粒可自宿主细胞内自发消除,但很缓慢...
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基因组DNA提取方法
...的PBS漂洗一次,离心收集。 3,重复2。 4,加入5mlDNA提取缓冲液,(10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,o.5%SDS),混匀。 5,加入25ul蛋白酶K,使终浓度达到100ug/ml,混匀,50℃水浴3h, 6,用等体积的酚抽提一次,2500r/min离心收集水相,...
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第二节 原核基因表达调控
...一个连续的开放读框(openreadingframe),5′端有翻译起始码(DNA存储链上是ATG,转录成mRNA就是AUG),3′端有翻译终止码(DNA存储链上是TAA、TGA或TAG,转录成mRNA就是UAA、UGA或UAG)。各结构基因头尾衔接、串连排列,组成结构基因群。至少...
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一种改良的腺病毒DNA的纯化方法
属于DNA病毒的腺病毒,已有40多年的研究历史,目前作为有效的病毒载体在基因治疗和基因疫苗研究中有良好的应用前景。腺病毒的分离纯化是研究腺病毒的基本技术,近年来我们在研究中,对常规的方法进行一些改进,简化了...
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质粒DNA的提取与纯化
1质粒DNA的提取 质粒DNA是细菌细胞中小的共价闭合环状双链DNA。由于基因工程中使用的载体主要是质粒,因此,质粒DNA的提取和纯化是进行基因工程的重要前提。提取质粒DNA的方法很多,下面介绍几种有代表性的程序。 1)...
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乙型肝炎病毒核酸水平与血清标志物模式及肝细胞损害关系的探讨
【摘要】目的探讨乙型肝炎患者HBV-DNA含量与乙肝血清标志物表达模式及肝细胞损害的关系。方法以完全闭管式PCR和荧光探针技术相结合的方法检测867例乙肝患者血清HBV-DNA的含量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝血清标志...
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2-2-1核酸研究的历史
...导致细菌转化的原因,他们发现从S型肺炎球菌中提取的DNA与R型肺炎球菌混合后,能使某些R型菌转化为S型菌,且转化率与DNA纯度呈正相关,若将DNA预先用DNA酶降解,转化就不发生。结论是:S型菌的DNA将其遗传特性传给了R型菌,DN...
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丙型肝炎病毒包膜蛋白E2人源单链可变区抗体的筛选与鉴定
...的抗体文库。辅助噬菌体M13K07购于Pharmacia公司,Wizard质粒DNA提取纯化试剂盒购于Promega公司。其他试剂均为国产分析纯。 1.2特异性HCVE2噬菌体人源单链可变区抗体的筛选首先将噬菌体抗体库扩增活化,用辅助噬菌体M13K07侵染...
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4-1-2操纵元(operon)的基本组成
...是一个连续的开放读框(openreadingframe),5’端有翻译起始码(DNA存储链上是ATG,转录成mRNA就是AUG),3’端有翻译终止码(DNA存储链上是TAA、TGA或TAG,转录成mRNA就是UAA、UGA或UAG)。各结构基因头尾衔接、串连排列,组成结构基因群。至少...
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第七节 诊断
...留血清标本,结合病毒分离可作原发感染诊断。 三、DNA探针 已广泛应用于检测CMV,其中以32P标记的探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。 四、聚合酶链式反应(PCR) (一)标本的...
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第六节 诊断
...法不同而异。这里分别介绍两种从外周血单核细胞中提取DNA和RNA的方法。 (1)从外周血单核细胞中提取DNA 方法A: ①取1ml经37℃快速解冻的Glyciegel冻存细胞置一支小离心管内。 ②加入2ml含有10%胎牛血清的RPMI-1640...
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乙型肝炎病毒S基因129Leu和145Arg变异株的抗原表达与DNA免疫研究
乙型肝炎病毒S基因129Leu和145Arg变异株的抗原表达与DNA免疫研究中华微生物学和免疫学杂志1999年第3期第19卷病毒学作者:何建文 武力 姚忻 李河民 闻玉梅单位:何建文 武力(博士研究生) 姚忻 闻玉梅(通讯联系人)20003...
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医学微生物学-遗传与变异复习题
...A.以温和噬菌体为媒介 B.转移的遗传物质为供体菌的DNA C.有关的噬菌体均为缺陷型 D.可由雌性菌变为雄性菌 E.以上都不是8.白喉杆菌外毒素的产生与下列哪一方式有关A.基因突变 B.转化 C.转导 D.溶原性转...
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美国联邦调查局更新DNA质量保证标准,加入快速DNA分析技术
...亚州普莱森顿消息――美国联邦调查局(FBI)更新了现有的DNA数据库标准,为DNA数据库实验室使用快速DNA分析仪进行快速DNA分析和改良快速DNA分析的质量保证标准增加了一份附录。快速DNA分析技术能在不到两小时内生成DNA基因图,...
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类风湿关节炎患者基因组DNA甲基化水平的初步研究
...No.8P.462-4657(南京)为了研究类风湿关节炎(RA)患者基因组DNA甲基化水平及影响基因组DNA甲基化水平的因素;并分析其与CD4+T细胞表面LFA-1表达水平的联系,探讨基因组DNA甲基化水平变化与RA发病的关系。研究者测定21例RA患者和20名...
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荧光定量PCR检测347例HBV-DNA结果分析
...ELISA法检测患者血清HBV-M不同的标志物组合时,观察其HBV-DNA阴性、阳性及阳性的拷贝数。方法347例患者血清分别用ELISA和荧光定量PCR(FQ-PCR)检测。结果148例HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+),其HBV-DNA阳性146例,阳性率99%,定量...
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SLET细胞功能的改变
...血清可溶性IL-2R(sIL-2R)、IL-6及尿sIL-2R、IL-6水平、抗ds-DNA抗体,用疾病活动性评分(SLAM)判断疾病活动性,并进行分析。结果SLE患者腺苷处理前ERF-R显著低于正常(P<0.05),处理后ERF-R则显著高于正常(P<0.001);PBMC的PHA淋转...
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HBV-DNA定量与乙肝血清学标志物及肝功能关系分析
【关键词】HBV-DNA乙肝血清学标志物功能 TherelationshipbetweenHBV-DNAandHBV-M,liverfunction. XieYong,ZhangJiong-jiong,WANGHai-bo,etal. (DepartmentofLaboratoryMedicine,HainanMedicalCollege,Haikou570311.HainanPRChina) Abstract:ObjectiveToexploretherelationshipbetween...
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TLR9/MyD88signalingisrequiredforclassswitchingtopathogenicIgG2aand2bautoantibodiesinSLE
...kidney,wheretheyinduceinflammationresultinginpathologicalevents(6).IgGanti-DNAautoantibodiesareageneralfeatureoflupusandthemolecularmechanismsthatresultintheselectionandexpansionofanti-DNAautoantibodieshavebeensuggestedtoinvolvetheToll-likereceptors(TLRs).Inparticular,TLR9anditssignalingmoleculeMyD8...
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乙型肝炎病毒DNA定量值与HBeAg、抗-HBe的相关性分析
...2006Vol.27No.8P.709-71114(北京)为了探讨乙型肝炎(乙肝)病毒DNA的拷贝数(HBVDNA)与HBeAg、抗-HBe的相关性。研究者对883例乙肝患者采用美国雅培公司AXSYM全自动酶免疫分析仪及配套试剂,进行微粒子酶免分析(MEIA)法检测HBeAg、抗-HBe和Roche...
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五加双参片对60Co辐射小鼠骨髓细胞微核及胸腺DNA含量的影响
【摘要】目的探讨五加双参片对小鼠骨髓细胞微核及胸腺DNA含量的影响。方法将小鼠用60Co辐射后连续给药7d,灌胃,处死小鼠,取骨髓和胸腺,计数微核细胞数和测定胸腺DNA含量。结果五加双参片(2.5g/kg,4.5g/kg)2个剂量组和骨...
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采取改良SDS法对天麻花葶DNA提取研究
采取改良SDS法对天麻花葶DNA提取研究(pdf) 【摘要】以天麻花葶为材料,采用改良SDS法对天麻DNA提取进行了研究,经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测,能得到高纯度的DNA,OD260/OD280在1.75~1.9之间,蛋白质、多糖、RNA等去...
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可卡因诱导大鼠肝细胞凋亡的研究
...布直方图显示,正常肝组织细胞主要由2类细胞组成,按DNA含量排列在相应的峰道数内,故可见如下三个峰。第1个峰为2C峰(二倍体量DNA的细胞群)。FCM分析显示对照组分布直方图均以2C峰为主,其次为4C峰。在2C峰之前几乎没有...
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第八节 诊断
...敏感性高,特异性强的快速检测方法,标本中含有1fgHSV-DNA就可以检出,其在HSV感染的诊断研究中发展较快,且分型检测HSV是发展的趋势。 1、标本采集和处理 (1)标本采集 ①脑脊液:直接无菌采取患者0.5ml脑脊液标...