与DNA复性相关的文献报道

第二节　DNA的变性与复性

第二节　DNA的变性与复性　　一、DNA变性　　DNA变性是指双螺旋之间氢键断裂，双螺旋解开，形成单链无规则线团，因而发生性质改变（如粘度下降，沉降速度增加，浮力上升，紫外吸收增加等），称为DNA变性。加热、改变DNA溶...

2-2-6核酸的变性和复性

DNA的变性DNA的复性核酸分子杂交　　变性（denaturation）和复性（renaturation）是双链核酸分子的二个重要物理特性。也是核酸研究中经常引用的术语。双链DNA，RNA双链区，DNA：RNA杂种双链（hybridduplex）以及其它异源双链核酸分子（...

第三节　DNA的二级结构与功能

...终止处常常会出现双重终止密码子。　　(四)DNA的变性、复性与分子杂交　　DNA双螺旋结构模型，不仅与其生物功能有密切关系，还能解释DNA的重要特性棗变性与复性，这对于深入了解DNA分子结构与功能的关系又有重要意义。　...

影响结核杆菌PCR结果准确性的因素

...范化、标准化是十分必要的。其中实验条件变化最大的有复性温度、循环次数、标本用量和循环各等温点保持时间选择等，并且这些条件随扩增产物不同有一定差异。复性温度与PCR特异性和扩增效果有密切关系:温度高低会影响...

第十八章　诊断分子生物学基本技术--第一节　概述

...对形成双链，形成的双链与变性前的结构完全相同，称为复性。解链的DNA溶液在260nm处吸光值A260增大，即核苷酸＞单链DNA＞双链DNA，称为高色效应，反之为低色效应。以50μg/ml为例，A260分别为：双链DNA＝1.00，单链DNA＝1.34自由碱...

第一章　基因诊断与性传播疾病--第一节　基因诊断的分子生物学基础

...个核小体彼此相联沿染色质纤维的纵轴列成一种串珠状重复性结构。串珠状核小体长链可进一步卷曲，形成螺旋筒结构。在形成染色单体时，螺旋筒再进一步卷曲、折叠。人体每个细胞中长约1.7μm的DNA双螺旋链，最终被压缩8400...

实时PCR检测HSV2DNA的方法学评价及应用

...用FQPCR和ELISA法同时检测，并进行比较；另对FQPCR从重复性、灵敏度、线性范围、特异性几方面进行方法学评价。结果对60份临床标本检测，ELISA法的阳性率为16.7%，FQPCR法的阳性率为31.7%，明显高于前者（P<0.05)。FQPCR法的...

PCR反应条件的选择

...或PCR产物完全变性，就会导致PCR失　　败。　　②退火(复性)温度与时间：退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃～60℃，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA比引物复杂得多，引物和模板之间的碰...

第三节　基因扩增技术（PCR）

...。引物与互补DNA结合后，以靶DNA单链为模板，经反链杂交复性（退火），在TaqDNA聚合酶的作用下以4种三磷酸脱氧核苷（dNTP）为原料按5'到3'方向将引物延伸、自动合成新的DNA链、使DNA重新复制成双链。然后又开始第二次循...

肿瘤分子遗传学研究方法进展

...行筛选扩增。在这一步PCR扩增反应中，只有那些自身得以复性的检测DNA扩增子具有PCR引物的结合位点而被扩增，而自然复性的驱动DNA扩增子与那些两种DNA形成的异源双链DNA则不能被扩增，实际上在整个扩增过程中，驱动扩增子的...

分子生物学试验方法探讨三－如何选择凝胶

...质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白质需要复性至蛋白的天然构象。Superdex75、QSepharoseFF和pheny1SepharoseFF分别被发现有助包涵体蛋白的复性。一般包涵体蛋白样品的纯度越高复性效果越好。SOURCE30RPC反相层析介质很适...

结核分枝杆菌ERIC-PCR分型技术的建立

...心12min，取上清做为PCR模板。　　1.3PCR反应组成优化及重复性　　为了实验的准确性和可重复性，分别从PCR反应的模板质量、Mg2+浓度、引物浓度、DNA聚合酶用量、dNTPs浓度几个方面逐一对PCR反应进行了优化组合，以选择最佳PCR组...

蛋白复性（四）-浅谈蛋白质折叠的有关问题

...蛋白质折叠研究中得到的规律推广到体内，用变性蛋白的复性作为新生肽段折叠的模型，并认为细胞中新合成的多肽链，不需要别的分子的帮助，不需要额外能量的补充，就应该能够自发的折叠而形成它的功能状态。　　1988年...

质粒DNA的碱裂解法提取与纯化

...质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。　　纯化质粒DNA的方法通常是利用了质粒DNA相对较小及共价闭环两个性质...

肠球菌随机扩增多态性DNA分型及应用研究

...是一种特异、敏感、简便快速、分辨力强、分型率高、重复性好的分型方法。可有效地对肠球菌进行基因分型，并且肠球菌的RAPD分型与其耐药性有一定关系。　　【关键词】肠球菌;随机扩增多态性DNA;基因分型　　Studyontypingofent...

第二节　核酸分子杂交法

...子。同一个二聚体中的两个分子在变性解离后重组合称为复性。利用两条不同来源的多核苷酸链之间的互补性而使它们形成杂交体双链叫核酸杂交。与核酸杂交技术相对应的另一项技术被称为探针技术，它是指利用标记分子对其...

科学家从蛋壳化石中提取出巨型恐鸟DNA

...CharlotteOskam)和同事表示，蛋壳是一种具有良好遗传物质恢复性的薄膜，在世界各地的化石沉积物中经常被发现，而他们从蛋壳中提取DNA样本的研究在全球范围内尚属首例。研究结果刊登在英国《皇家学会会报B辑：生物科学》上...

BPI23-Fcγ1重组融合蛋白在E.coli中的表达

...I23-Fcγ1重组蛋白，表达量约占菌体蛋白总量的20%～30%；(5)复性后重组蛋白具有抗菌活性和结合蛋白A的作用。结论　pBV-BPI600-Fcγ1700重组表达载体构建成功；在E.coli中得到表达，获得具有抗菌活性的BPI23-Fcγ1重组蛋白。Expressionofrecom...

如何选择凝胶

...介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然构象。Superdex75、QSepharoseFF和PhenylSepharoseFF分别被发现有助包涵体蛋白的复性。一般包涵体蛋白样品的纯度越高，复性效果越好。SOURCE30RPC反相层析介质很...

如何选择凝胶

...介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然构象。Superdex75、QSepharoseFF和PhenylSepharoseFF分别被发现有助包涵体蛋白的复性。一般包涵体蛋白样品的纯度越高，复性效果越好。SOURCE30RPC反相层析介质很...

科学家发现垃圾DNA对基因调控的作用

科学家早已知道，有些“垃圾”DNA（重复性DNA片段）能够进化成外显子（exon），作为高等有机体内编码蛋白基因的构成成分。美国科学家近日发现证据表明，大量来自垃圾DNA的外显子在基因调控中发挥着作用。相关论文10月17日...

2-1-6真核生物染色体基因组的结构和功能

...许多DNA序列并不转录成mRNA用于指导蛋白质的合成。DNA的复性动力学研究发现这些非编码区往往都是一些大量的重复序列，这些重复序列或集中成簇，或分散在基因之间。在基因内部也有许多能转录但不翻译的间隔序列（内含子...

人绒毛膜促性腺激素β亚基在大肠杆菌中的表达

...词：人绒毛膜促性腺激素β亚基；序列分析；基因表达；复性　　摘　要　目的：以该室克隆的PCRⅡ/hCGβ载体为模板，亚克隆到表达载体PG5中使hCGβ基因在大肠杆菌中进行高效表达。方法：改变部分hCGβ序列，得到重组PG5/hCGβ载体...

蛋白复性（五）-蛋白质复性

关键词：蛋白质复性；环糊精；分子伴侣　　重组DNA技术为大规模生产目标蛋白质提供了崭新的途径。但人们在分离纯化基因工程表达产物时却遇到了意想不到的困难：很多利用大肠杆菌为宿主细胞的外源基因表达产物如尿激酶...

四维杂交技术推动基因检测进入临床时代

...统核酸分子杂交技术，一改传统DNA检测技术检测结果再重复性差的弱点，做到了被测物在不同时间、不同地点、不同操作者以及不同种类反应之间的再重复性，从而实现了临床应用反应体系与实验室检测关键参数的反应体系的一...

昆虫体内细菌可纠正基因缺陷

...内的细菌在将DNA翻译成蛋白的过程中，可以纠正基因的重复性缺陷，进而使蛋白发挥正常功能，该结果发表在近期《美国国家科学院学报》上。　　包括蚜虫、蚂蚁及舌蝇等多种昆虫，均需依靠体内特定的细菌才能生存，这些细...

PCR-SSCP技术

...：①PCR扩增靶DNA;②将特异的PCR扩增产物变性，而后快速复性，使之成为具有一定空间结构的单链DNA分子;③将适量的单链DNA进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳;④最后通过放射性自显影、银染或溴化乙锭显色分析结果.若发现单链DNA...

2-2生物化学与分子生物学技术

...　　分子杂交技术（molecularhybridization）是在研究DNA分子复性变化基础上发展起来的一种技术。其原理是，具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段，在适当条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分...

程远辉，张兴:分子标记技术在中药鉴定中的应用

...点是共显性，可以区别纯合和杂合基因型，而且稳定、重复性强，目前在某些生物体中开发的RFLP的探针已经遍及整个基因组。但是RFLP存在较多缺点，如对DNA需要量较大，过程较为复杂，所需的放射性探针对人体危害较大。而分...

23株灵芝栽培菌种的DNA指纹鉴别

...增反应程序为:92℃预变性5min,35个循环的92℃变性1min、35℃复性1min、72℃延伸2min。最后,72℃延伸10min,终止反应。　　1.4.3琼脂糖凝胶电泳取上述PCR产物8μl点样于1.4%琼脂糖凝胶上,于0.5×TBE缓冲液中5V/cm电泳。EB染色在Bio-Rad凝胶成像...