浓缩红细胞的制备
可在全血有效保存期内的任何时间移出血浆,根据移出血浆量不同,红细胞比容可为 70%~90%,但以70%的红细胞为佳,便于输注。
制备方法
离心法
(1)用二联塑料血袋采集全血。
(2)将血袋连同转移袋一起,用塑料气包或其他方法夹持血袋,使血袋上部在离心杯中鼓起,处于直立的位置。
(3)将平衡好的成对离心杯,准确地挂在离心机转头两个对称的位置上盖好离心机内外盖,5000g离心7min,温度4℃±2℃,使红细胞快速下沉。如离心机性能有限,不可能达到以上离心力时,可根据情况,相应延长离心时间。
(4)将血袋放在血浆挤压器两夹板之间,去掉血袋与分浆管之间的堵头,让血浆流入转移袋内。
(5)热合封口,并切断连接血袋和转移袋之间的分浆管,血袋中留下部分即为浓缩红细胞。
自然沉降法
将血袋垂直吊挂于4℃±2℃冰箱内,使红细胞自然下沉1~3d,或将血袋呈70°~80°角立于冰箱,需用时,用一次性分浆器分出血浆,制得浓缩红细胞。
保存
红细胞比容不超过80%,其保存期同全血。
洗涤红细胞的制备
一般用生理盐水反复洗涤3~6次。经洗涤的红细胞,除白细胞和血小板减少外,血浆蛋白也极少,红细胞中残存的血浆蛋白含量约为原总蛋白的1%以下。
制备方法
手工洗涤法
必须在无菌室的超净台上操作。目前国家尚未生产统一的一次性洗涤器,故洗涤方法也不尽相同,在此仅介绍中国医学科学院输血研究所采用多节洗涤器 (包括1个三通接头和多个二通接头与多条塑料管连接而成)的洗涤方法。
(1)用三联塑料血袋采集全血。
(2)以1160g离心8min温度20℃。
(3)分出上层血浆至2号转移袋,将白膜层和白膜层下1.0~1.5cm厚的红细胞移至 1号转移袋,血袋中留下浓缩红细胞。
(4)将浓缩红细胞袋与多节洗涤器三通接头一端连接,1000ml或500ml袋,或 500ml瓶生理盐水和1000ml空塑料袋分别与三通接头两端连接。
(5)松开盐水袋塑料管上的止血钳,向血袋内灌入生理盐水250-300ml。
(6)取下血袋,热合封闭管口,充分混匀后再以5000g离心6min,温度4℃±2℃。
(7)将血袋再次连接到多节洗涤器第2个二通接头一端,松开空袋塑料管上的止血钳,将洗涤液及剩余的白膜层尽量挤入塑料袋内。
(8)重复步骤(5)-(7),反复洗涤红细胞 3~6次,至最后1次挤出洗涤液及剩余白膜后,再注入约等于红细胞1/2的生理盐水,配制约为70%比容的红细胞悬液。
机器洗涤法
即以血细胞分离机洗涤红细胞,有条件时可采用。
保存
红细胞洗涤后,可暂放在4℃±2℃冰箱保存,最好在6h内输用,保存不得超过24h。
代浆红细胞的制备
将全血离心并移除绝大部分(90%以上)血浆后,将代血浆(大多含羟乙基淀粉和葡萄糖)或晶体盐保存液加入红细胞内,代替移出的血浆,制成代浆红细胞或晶体盐红细胞悬液。
制备方法
1.用带有代血浆保存液的三联塑料袋采集全血。
2.4℃±2℃条件下,以5000g离心 7min。
3.分出上层血浆移至空转移袋。
4.再将另一转移袋内代血浆保存液加入红细胞内,其用量约等于原血浆。
5.将红细胞与代血浆保存液充分混匀。
6.热合封口并切断分浆管,制成代浆红细胞。
附
如用单袋采血,离心分出卜层血浆后,可通过连接管灌入代血浆保存液。制备的代浆红细胞在 24h内输注。
保存
保存期因代血浆保存液的种类而定,如代血浆大多数含有羟乙基淀粉和葡萄糖等,于4℃±2℃保存期为14-21d。SAG(氯化钠、腺嘌呤和葡萄糖)保存液和SAGS保存液(氯化钠、腺嘌呤、葡萄糖和蔗糖),添加到浓缩红细胞中,其有效保存期分别为35d和 42~49d。