4 血清甘-鹅去氧胆酸医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 取材
4.4 原理
血清中甘-鹅去氧胆酸(CDCG)与血浆蛋白相结合,用乙醇沉淀蛋白质并提取CDCG,和试剂中125Ⅰ-组胺-CDCG竞争性与抗体结合,根据竞争抑制基本原理,从标准曲线得出血清中CDCG浓度。
4.5 试剂
(1)抗血清的制备:取甘-鹅去氧胆酸(CDCG)和BSA,经EDC偶联作为免疫原,免疫于新西兰雄兔(2.0~2.5kg),6个月后获得优质抗血清(详见甘-胆酸测定)。
(2)125Ⅰ-组胺-CDCG的制备:取CDCG和盐酸组胺,经EDC的作用合成组胺-CDCG。用氯胺T氧化法标记。硅胶纸层析分离纯化(详见甘-胆酸测定)。
(3)0.05%Tween-PBS:取0.1mol/L KH2PO4 16ml,0.1mol/L Na2HPO4 84ml,NaCl 8.5g,明胶1g,Tween20 0.5ml,加水至1000ml。
(4)标准CDCG液:精称取CDCG302μg溶于100ml无水乙醇中。工作标准液为5~320pmol/ml,各取100μl至管中,蒸干。
(5)300g/L:PEG液。
4.6 操作方法
(1)血清用无水乙醇稀释50倍,离心去蛋白,吸取0.1ml,蒸干。另取含不同浓度的CDCG标准管若干为系列标准管。
(2)操作程序见表1。
放4℃后离心(3500r/min)15min,去上清液,测沉淀物(B)放射性。
(3)以LogitB/B0:对标准管含量的对数值计算直线回归方程,根据此方程计算样品量。
4.7 正常值
国内有人报道121名正常对照者的空腹血清CDCG X±SD为3.01±1.5nmol/ml,95%正常范围为0.46~5.9nmol/ml。男、女分别为3.23±1.52nmol/ml和2.8±1.45nmol/ml。
CG/CDCG的比值为0.34~1.22。
4.8 临床意义
CDCG是人体内胆汁酸主要成分之一,其理化性质和代谢途径与CG相似。
(1)急性病毒性肝炎起病最初期,ALT和BiL尚未达到高峰时,CDCG和CG已急剧上升,表明血清CDCG和CG测定有助于早期诊断急性病毒性肝炎,其明显升高的机制除因肝细胞对其摄取、排泌障碍外,可能与肝内胆汁郁滞有关。
(2)慢性肝炎时,血清CDCG的含量仍增高,观察CG/CDCG的比值更有价值。CG/CDCG比值持续<1提示预后不良。CG/CDCG>1或有上升趋势,提示预后较好或肝功能有改善。慢性肝病CG/CDCG比值以肝硬化最低,其次慢性迁延性肝炎最低。这提示CDCG升高的幅度和CG/CDCG比值减低的程度与肝损伤的严重性有关。
4.9 附注
测定苷氨胆酸与苷鹅脱氧胆酸的比值可能具有诊断价值,因为约80%肝细胞疾病患者该比值<1,而80%胆汁郁积性疾病患者该比值>1。