3 细胞色素C溶液药典标准
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 汉语拼音
Xibaosesu C Rongye
3.1.3 英文名
Cytochrome C Solution
3.2 来源含量
本品系自猪或牛心中提取的细胞色素C的水溶液。每1ml中含细胞色素C不得少于15mg。
3.3 制法要求
本品应从检疫合格的猪或牛心中提取,生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。
3.4 性状
本品为深红色的澄清液体。
3.5 鉴别
(1)取含铁量项下的供试品溶液1ml,滴加20%三氯醋酸溶液,即生成棕色或棕红色的凝乳状沉淀,溶液的红色消失。沉淀能在水中溶解,溶液显棕红色。
(2)取含铁量项下的供试品溶液1ml,置50ml量瓶中,用磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠1.38g与磷酸氢二钠31.2g,加水适量使溶解成1000ml,调节pH值至7.3)稀释至刻度,加连二亚硫酸钠约15mg,摇匀,照紫外-可见分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ A)测定,在520nm与550nm的波长处有最大吸收,在535nm的波长处有最小吸收。
3.6 检查
3.6.1 含铁量
3.6.1.1 标准铁溶液的制备
取硫酸铁铵50g,加水300ml与硫酸6ml的混合液溶解后,加水适量使成1000ml,摇匀。精密量取25ml,置碘瓶中,加盐酸5ml,混合,加碘化钾试液12ml,密塞,静置10分钟,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液1ml,继续滴定至蓝色消失。每1ml硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于5.585mg的Fe。根据硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)消耗的量(ml),计算每1ml中含Fe量(mg)。精密量取适量,加硫酸稀释液(取稀硫酸2ml,用水稀释至500ml)制成每1ml中含23μg的Fe。
3.6.1.2 供试品溶液的制备
精密量取本品适量(约相当于细胞色素C 100mg),置10ml量瓶中,用水稀释至刻度。
3.6.1.3 测定法
精密量取供试品溶液5ml,置已炽灼至恒重的坩埚中,蒸干,在105℃干燥至恒重,精密称定重量W1,缓缓炽灼至完全炭化后,继续在500~600℃炽灼使完全灰化并恒重,精密称定重量W2。另精密量取供试品溶液1ml,置25ml量瓶中,加30%过氧化氢溶液0.7ml与稀硫酸0.5ml,置水浴中,加热30分钟,取出,放冷,精密加入联吡啶试液2ml,置冷水浴中,缓缓加入亚硫酸钠试液5ml,随加随振摇,置60~70℃水浴中,加热30分钟,取出,放冷至室温,用水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ A),在522nm的波长处测定吸光度A1,另精密量取标准铁溶液2ml,置25ml量瓶中,照上述方法,自“加30%过氧化氢溶液0.7ml”起,依法操作,测定吸光度A2,按下式计算,含铁量应为0.40%~0.46%。
3.6.2 细菌内毒素
取本品,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅺ E),每1mg细胞色素C中含内毒素的量应小于5.0EU。
3.6.3 过敏反应
取本品适量,加注射用水稀释成每1ml中含细胞色素C 7.5mg的溶液,作为供试品溶液,依法检查(2010年版药典二部附录Ⅺ K),应符合规定。
3.6.4 活力
照细胞色素C活力测定法(2010年版药典二部附录Ⅻ B)测定,不得低于95.0%。
3.7 含量测定
精密量取含铁量项下的供试品溶液1ml,置50ml量瓶中,用鉴别(2)项下的磷酸盐缓冲液稀释至刻度,加连二亚硫酸钠约15mg,摇匀,照紫外-可见分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ A),在约550nm的波长处,以间隔0.5nm找出最大吸收波长,测定吸光度,按细胞色素C的吸收系数()为23.0计算,即得。
3.8 类别
3.9 贮藏
3.10 制剂
3.11 版本
《中华人民共和国药典》2010年版