4 唾液尿素氮的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
4.3 取材
4.4 唾液尿素氮的测定原理
尿素在尿素酶作用下水解成NH4+和CO2,NH4+、NADH和α-酮戊二酸在谷氨酸脱氢脱氢酶作用下生成CO2、谷氨酸和NAD+。由于NADH被氧化成NAD+,在340nm吸光度降低,其吸光度降低值与尿素浓度成正比。
4.5 试剂
目前各厂家所产试剂盒并不完全相同。缓冲液多用0.1mol/L(pH 7.5±0.1)的磷酸盐缓冲液。α-酮戊二酸5mmol/L,NADH 3.5mmol/L,尿素酶15000U/L,谷氨酸脱氢脱氢酶2000U/L,ADP 2mmol/L。
4.6 操作方法
试剂样品比为70∶1,37℃,340nm,延滞时间30s,读数时间30s。具体分析条件可据试剂盒和仪器的介绍确定,最好每次定标。
4.7 正常值
4.1~7.3mmol/L (11.4~20.4mg/dl)。
4.8 化验结果临床意义
4.8.1 (1)升高
C.利尿剂。
②尿素生成过剩:
A.高蛋白饮食。
B.组织坏死(异化亢进):绝食、发热、感染症、糖尿病、癌、甲状腺功能亢进症、外科手术、使用类固醇激素等。
③消化道出血。
4.8.2 (2)降低
①尿素生成减少:
B.低蛋白饮食。
A.多尿。
B.尿崩症。
4.9 附注
(1)该法最常出现的问题是试剂失效或反应系统被污染。试剂中最不稳定的是NADH和谷氨酸脱氢脱氢酶。在分析过程中应注意以下几个方面:如用血浆则不能用含氟化合物或NH4+的抗凝剂,前者可抑制尿素酶活性,后者则可参与反应。
(2)试剂空白吸光度应大于1.2A,否则说明NADH被氧化。同种试剂、仪器,在分析条件不变的情况下,测定得F值应相对恒定,否则说明试剂失效。
(3)复溶试剂勿振动,以免酶变性失活。必须用无氨水复溶试剂。试剂杯、样品杯、反应杯要无氨、洁净、无酸碱污染,应每次定标,并跟测质控血清。