定点突变
...引物的延伸产物退火后配对成为带缺刻的开环质粒。DpnI酶切延伸产物,由于原来的模版质粒来源于常规大肠杆菌,是经dam甲基化修饰的,对DpnI敏感而被切碎(DpnI识别序列为甲基化的GATC,GATC在几乎各种质粒中都会出现,而且不...
遗传学WS/T 594—2018 蝇类抗药性检测方法 家蝇不敏感乙酰胆碱酯酶等位基因检测法
...下检测,有清楚单一的609bp的条带的PCR产物用于进行以下酶切反应。7.4取合格样品(即电泳检测产物为609bp)的PCR产物设置两个酶切反应,反应A用Bsp1286I酶、反应B用EaeI酶进行酶切,酶切反应体系的设置根据酶产品的使用说明进行...
词条;中华人民共和国卫生行业标准;卫生标准分子标记
...类。基于分子杂交的分子标记这类标记利用限制性内切酶酶切及凝胶电泳分离不同生物体的DNA分子,然后用特异探针进行杂交,通过放射性自显影或非同位素显色技术揭示DNA的多态性。限制性片段长度多态性(RestrictionFragmentLengt...
遗传学限制片段长度多态性
...。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切酶的酶切位点碱基发生突变,或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失,导致酶切片段大小发生了变化,这种变化可以通过特定探针杂交进行检测,从而可比较不同品种(个体...
物理图
...色体分段进行研究。最通常的物理图的构建方法是把限制酶切的DNA片段,按其次序排列连接起来。作图的技术路线基本上分两类:一类是由长到短作图,另一类则是由短到长作图。前者是将基因组DNA用切点很少的限制酶如NotI等...
物理图谱
...上的切口是以特异序列为基础的,核苷酸序列不同的DNA,经酶切后就会产生不同长度的DNA片段,由此而构成独特的酶切图谱。因此,DNA物理图谱是DNA分子结构的特征之一。DNA是很大的分子,由限制酶产生的用于测序反应的DNA片段只是...
PCR实验技术
...可以对引物进行必要的修饰,例如可以在引物的5′端加酶切位点序列;标记生物素、荧光素、地高辛等,这对扩增的特异性影响不大。但3′端绝对不能进行任何修饰,因为引物的延伸是从3′端开始的。这里还需提醒的是3′端...
手术重组质粒
...体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段,然后体外使两者相连接,再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中,如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的载体...
siRNA
...Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。双链RNA经酶切后会形成很多小片段,称为siRNA。SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。siRNA原理RNA干涉(RNAi)在实验室中是一种强大的实验工具,利用具有同源性...
生物学转座子
...构(crossoverstructure),受体分子上产生交错的单链缺口,与酶切后产生的转座子单链游离末端连接,并在插入位点上产生正向重复序列;最后,由此生成的交换结构经产生缺口(nick)而使转座子转座在受体分子。供体DNA分子上留下双...