纤维母细胞生长因子的提纯及抗血清的制备

...丙烯酰胺、N、N-亚甲基丙烯酰胺、溴酚兰、过硫酸铵、考马斯亮蓝、十二烷基磺酸钠购自Serva公司。　　1.2　方法　　1.2.1　提纯抗原　先将新鲜牛脑组织匀浆，用硫酸铵分步沉淀蛋白，再进行CM-SephadexC-50离子交换层析和肝素-Seph...

考马斯亮兰法（Bradford法）

...好的蛋白质溶液测定的方法。　　1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵...

乙型肝炎病毒e抗原的纯化及其在人血清抗体检测中的应用

...纯化后免疫打点分析，收集阳性蛋白。经SDS-PAGE电泳，考马斯亮蓝G250染色，显示为单一的蛋白带，用免疫印迹法(Westernblot)和免疫打点(lmmunodot)法，确定表达产物的特异性。将纯化的HGeAg用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫条。方法　...

亲和层析法从红芸豆中纯化红血球凝集素的研究

...文献[8],使用不连续电泳(SDSPAGE),凝胶浓度为12%,pH8.3，考马斯亮蓝R250染色。　　2结果与讨论　　2.1红芸豆中红细胞凝集素的分离纯化　　经硫酸铵盐析除杂蛋白,透析除盐后即制得凝集素粗品。该粗品经甲状腺亲和树脂吸附后,...

自身抗原La融合蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫学鉴定

...准蛋白，未经诱导的菌体蛋白同时进行SDS-PAGE电泳，经考马斯亮蓝染色，分析电泳条带。　　1.5　免疫印迹法分析重组融合蛋白的抗原性　重组蛋白经SDS-PAGE电泳后进行转印。将转印后的NC膜剪成条带，用含3%BSA的PBS(pH7.4)封闭1h。...

结核分支杆菌katG蛋白的高表达与纯化

...表达，分别对不同诱导时间的表达产物进行SDS-PAGE以及考马斯亮蓝染色。获得稳定的高表达菌株后采用XpressTM蛋白纯化系统对超声破菌液进行纯化。最后对纯化产物进行过氧化氢酶活性的初步检测。结果　对诱导后的重组大肠杆...

免疫印迹在肌钙蛋白T杂交瘤筛选中的应用

...下以500V恒电压电泳1.5h。电泳结束后，切下部分凝胶用考马斯亮蓝R250染色，其余部分进行转膜:待转膜的凝胶与同等面积大小的滤纸、NC膜浸泡于转移缓冲液中30min，从下至上依次为:石墨阳极板、9张滤纸、NC膜、凝胶、9张滤纸、...

双向电泳

...检测2-DE的流行方法，可检测少到2～5ng的蛋白，因此较考马斯亮蓝R-250敏感.多数糖蛋白不能被考马斯亮蓝染色，一些有机染料不适于PVDF膜.放射性标记不依赖其代谢的活性，并仅适于对合成的蛋白质检测.另有一种改良的2-DE(差异...

苯肼法测定血清α1-酸性糖蛋白的研究

...光度法测定了血清中的含量。1材料与仪器1.1实验试剂考马斯亮蓝G250，甲基纤维素，盐酸，乙酸，高氯酸HClO4，氯化钠，2，4-二硝基苯肼。1.2仪器恒温水浴仪，UV-240紫外可见分光度计，真空冷冻干燥机FD-80L5型。1.3CBB溶液的制备称...

含HPV16E7的嵌合型VLPs引发细胞溶解反应

...白VLPs)。　　重组蛋白的鉴定：重组蛋白经10%SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色和Westernblot分析。后者转膜后用BPVL1单抗MC15(1∶2000)和HPV16E7单抗(1∶1000)杂交、ECL法显示杂交条带。另将样本进行透射电镜观察。　　CTL反应　　靶细胞的标记：...