简化的两步法细菌内同源重组高效制备p53基因重组腺病毒表达载体
【摘要】目的应用细菌内同源重组高效制备p53基因重组腺病毒。方法设计引物扩增p53基因,在上下游引物分别引入Xhol和HindⅢ酶切位点,将p53基因亚克隆连接到经相同酶切的pshuttle-cmv转移质粒上,转化DH5α筛选卡那霉素抗性菌落...
医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第2期胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在大鼠骨髓基质干细胞中的表达
...应用于脊髓损伤的基因治疗研究。研究者提取新生大鼠肾组织mRNA,用逆转录PCR法扩增GDNF全长cDNA,构建其真核表达载体PEG-GFP-GDNF,酶切及测序鉴定;然后转染原代培养的大鼠BMSCs,荧光免疫细胞化学及细胞形态学检测GDNF的表达。...
行业资讯;临床快报;神经科血红素加氧酶-1在器官移植中的保护作用
...异性的整合素,趋化更多中性粒细胞、单核巨噬细胞、T淋巴细胞聚集,加剧产生OFR和炎症介质如PG、PAF、IL-1、TNF-α、INF-γ、GM-CSF,造成内皮细胞进一步损伤、凋亡。(4)OFR和炎症介质亦可激活T淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞...
资料库;在线期刊;中华现代儿科学杂志;2004年第1卷第4期戊型肝炎病毒结构区基因的克隆表达及其在诊断中的初步应用
...ose-4B亲合层析柱得到纯化的抗原。结果 经应用发现,此基因重组抗原作为酶联免疫试剂的抗原,用于检测血清中抗戊型肝炎病毒抗体,与新加坡进口试剂盒有高度的一致性,和血清中抗体反应性更强。结论 预示该基因抗原可...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学趋化因子及其受体在人早孕绒毛组织中的表达特征及意义
...科杂志2006Vol.41No.6P.399-40211(上海)为了探讨人早孕绒毛组织中趋化因子CXCL16、CXCL12及其受体CXCR6、CXCR4的基因转录和蛋白表达特征。研究者收集早孕绒毛组织并分离滋养细胞,采用半定量RT-PCR方法,检测人早孕绒毛滋养细胞(含绒...
行业资讯;临床快报;妇科与产科DNA载体介导RNA干扰抑制LMP-1基因对鼻咽癌细胞转移能力的影响
...癌细胞中EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP-1)表达的可能性,观察LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞转移能力的影响。研究者将能转录出干扰RNA的DNA模板插入pAVU6+27质粒,构建能够介导RNA干扰的发夹状干扰RNA(shRNA)表达载体。采用磷酸钙共沉淀法,将...
行业资讯;临床快报;肿瘤相关3.幽门螺杆菌的免疫学研究--幽门螺杆菌的免疫学研究进展
...功的报道。Negrini等把从培养皿中分离的6株Hp混合后免疫小鼠,32d后将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P3X63.Ag8.653融合,细胞融合悬液于96孔板上培养生长杂交瘤细胞集落,用整个Hp作靶细胞的间接ELISA法筛选抗体,共获得21株阳性单...
医源资料库;医源图书馆;教材类;中国幽门螺杆菌研究人重组TFAR19蛋白对白血病细胞株HL-60的促凋亡效应①
...Expressedsequencetag)数据库进行检索和拼接,成功地克隆了小鼠TFAR19的编码区cDNA[5]。在这些工作的基础上,本文进一步发现,大肠杆菌表达的人重组TFAR19蛋白能够进入体外培养的HL-60细胞,并主要定位于细胞核,促进撤除血清的...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学上海二医大发现17OHD致病基因五种新突变
...传学研究,发现5种新的突变类型,而D487-F489del为最常见突变基因型。三维蛋白结构分析和体外实验表明基因型和表型存在一定的相关性。17OHD是一种常染色体隐性遗传疾病,为CYP17A1基因突变所致,是先天性肾上腺增生的少见类型,国内...
行业资讯;临床快报;遗传与基因组童贻刚发表基因组DNA剪接技术
...NA克隆方法的诸多弊端(RNA提取,cDNA制备),直接从任何组织来源的基因组DNA中快速克隆任意全长的cDNA序列。由于生物信息学的高速发展,人类以及各种模式生物的基因组全序列均已公开,可以在网上自由获取。然而对于生物...
医药经济;生物技术;技术要闻