标本DNA的分离与纯化
用5-10ml1xNTE(NaCl100mmol/L,Tris-HCl10mmol/lpH7.4,EDTa1mmol/LpH8.0)调整细胞为2×107个(组织应切碎置液氮冰冻,高速搅切成粉末后,加入缓冲液)。加1/10-1/20体积(V)10mg/ml蛋白酶(SigmaⅧ型),1/20v10%SDS,37℃2小时。加等量酚/3xNTE(3xNTE上封...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术DEAE-SephadexA-50纯化免疫球蛋白F(ab’)2的研究
...;DEAE-SephadexA-50近年来层析技术已广泛应用于生物高分子的分离和纯化,据报道,国内外一些生物制品厂家采用层析技术进行血浆蛋白分离、疫苗纯化[1]。破伤风抗毒素目前采用盐析法生产的产品存在杂蛋白含量偏高,特别是...
医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2007年第7卷第11期重组人IL-18和IL-18-GFP融合蛋白的表达及其生物学活性的研究
...和3'端引物分别为:5'-gttc 抽取健康人外周静脉血分离PBMC,提取总RNA,以oligodT为引物进行RT-PCR得到cDNA。以该cDNA为模板用相应引物扩增IL-18cDNA,并将所得PCR产物克隆于pET28a,构建成表达质粒pET28a/hIL-18。通过三步PCR法获得编...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学“生物技术产品中试与规模化生产配套技术与工艺的研究与示范”
...排规模500万元,承担单位自筹经费不低于1500万元。课题5蛋白质的微生物发酵与分离纯化技术1.研究目标通过项目实施,大幅提高我国蛋白质的微生物发酵与分离纯化技术专业化孵化能力及技术服务能力,加快我国蛋白质药物、...
药品天地;专业药学;制药工艺与技术待检测样品制备
...。因为在一般溶液中PCR扩增时,靶片段太少且不易被凝胶分离,故存在其它不同的DNA片段与其竞争引物的情况。美国MosaicTechnology公司发展了一种固相PCR系统。此系统包含两套引物,每套都可以从靶基因两头延伸。当引物和DNA样...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术成人虹膜色素上皮细胞的培养
...自体色素上皮细胞移植奠定基础。方法采用酶辅助的显微分离法对15只成人眼进行IPE的原代和传代培养,免疫组化鉴定细胞,并评价其部分生物学特性。结果培养的成功率达85%,原代培养需10~20天,而传代培养需10~14天,分裂...
合作平台;在线期刊;中华医学实践杂志;2004年第3卷第7期;其他膜技术:化学工业的明天
...工业现代化的进程。如酶是一种具有高度催化活性的特殊蛋白质,常用酶制剂的分子量正好落在超滤膜的分离范围内,超滤膜可用于纯化超氧化物歧化酶从蛋清中提取溶菌酶,分离发酵液中的谷氨酰胺转氨酶,采用超滤技术提取...
医药经济;生物技术;环保技术待检测样品制备
...。因为在一般溶液中PCR扩增时,靶片段太少且不易被凝胶分离,故存在其它不同的DNA片段与其竞争引物的情况。美国MosaicTechnology公司发展了一种固相PCR系统。此系统包含两套引物,每套都可以从靶基因两头延伸。当引物和DNA样...
医源资料库;医源图书馆;教材类;基因与疾病待检测样品制备
...。因为在一般溶液中PCR扩增时,靶片段太少且不易被凝胶分离,故存在其它不同的DNA片段与其竞争引物的情况。美国MosaicTechnology公司发展了一种固相PCR系统。此系统包含两套引物,每套都可以从靶基因两头延伸。当引物和DNA样...
医源资料库;医源图书馆;教材类;生物芯片技术蛋白质与多肽激素的放射免疫分析
蛋白质与多肽激素的放射免疫分析第一节 概述 1960年,美国学者Yalow和Berson创立了放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA),并首先用于糖尿病人血浆中胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破,开辟...
药品天地;专业药学;实验技术;生化实验;酶学实验