通用引物检测脑炎患者脑脊液疱疹病毒DNA及其酶切鉴
...0.2mol/LTris-HClpH7.5;25mmol/LEDTA;0.3mol/LNaCl;2%SDS和蛋白酶K)混匀后56℃水浴1~2小时;常规配制酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1);DNA沉淀溶于20μl三蒸水,-30℃短期保存备用。 8.PCR扩增:反应体积50μl。常规加入各种试剂,引物和...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学HSF4基因突变导致常染色体显性遗传核性白内障
...应体系中剂量,向0.5mlEP管中依次加入各试剂,短暂离心混匀;放入PCR扩增仪,于94℃预变性2min,冰浴冷却后,再加入TaqDNA聚合酶0.3μl,离心混匀;随后以94℃变性10s,47℃退火30s,72℃延伸40s,循环35次后,再于72℃延伸5min;置于4℃...
医源资料库;在线期刊;中华现代眼科学杂志;2006年第3卷第4期离子对反相高效液相色谱法测定头孢三嗪、7-氨基头孢菌烷酸及7-氨基头孢烯三嗪酸的含量
...腈320mL溶解后,再加pH7.0磷酸盐缓冲液44mL,加水至1000mL,混匀,抽滤即得。2 色谱条件色谱柱:天津特纳仪器公司kromasilC18(4.6mm×200mm,5μm),流动相:乙腈—四丁基溴化铵—pH7.0磷酸盐缓冲液—水(32∶0.32∶4.4∶63.6),检测波长270nm...
药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱论文流式细胞仪分析恶性肿瘤患者淋巴细胞功能状态变化
...试管中,分别加入病人外周血100μl试管中(EDTA—K2抗凝)混匀,室温避光孵育15min,然后加入500μlOPTILYSEC溶解红细胞,旋涡混合器混匀,室温避光10min,离心(1500r/min)弃去上清液,每管加500μlPBS混匀后用流式细胞仪进行检测,...
医源资料库;在线期刊;中华中西医杂志;2005年第6卷第20期酶联免疫吸附法检测瘦肉精
...管中,加1molNaOH300ul,混合15min。加入4mL,500mmolKH2PO4(pH3.0),迅速混匀置于4摄氏度的冰箱内保存至少1.5h。10000r/min离心15min,分离上清液。 1.2 试剂 盐酸克伦特罗—酶联免疫试剂盒 1.3 仪器 电热恒温水浴锅、酶标仪、离心...
药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱分析实例广东汉族人群系统性红斑狼疮与HLA-DQA1基因相关性研究
...入1.5ml离心管中,加入QIA-GEN蛋白酶K25μl和AL缓冲液200μl,混匀15s,70℃孵育10min,然后加入无水乙醇200μl混匀,将上述混合液转至DNA亲和柱上,离心10000rpm1min,去除滤过液,在柱上加入AW缓冲液500μl,离心1min,重复洗涤1次,然后...
合作平台;在线期刊;中华现代临床医学杂志;2005年第3卷第14期乙型肝炎病毒荧光定量检测与其血清标志物检测结果的相关性研究
...100μl,分别加到0.5ml离心管中;加入100μlDNA提取液1,振荡混匀,13,000rpm离心10min;吸弃上清液(离心时注意固定离心管方向、尽可能吸弃上清液且不碰沉淀);再加入25μlDNA提取液2,振荡混匀,2,000rpm离心10s,100℃干浴或沸水浴10mi...
合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第8期;论著IL10对TGFβ刺激成纤维细胞转化的影响
...消化液,再分别加入羟脯氨酸检测试剂盒中试剂一0.5ml,混匀,室温静止10min,分别加入试剂二0.5ml,混匀,室温静置5min,分别加入试剂三1.0ml,混匀,60℃水浴15min,流失冷却后,3500r/min离心10min,取上清在550nm处,1cm光径,蒸馏...
医源资料库;在线期刊;滨州医学院学报;2009年第32卷第3期毕赤酵母菌表达弓形虫GRA1蛋白接种小鼠免疫效果
...抗浓度已调整为0.05μg/μl)单抗各5μl,用旋涡振荡器混匀10sec,室温避光放置30min,1500rpm离心5min,弃上清,每管加入2mlPBS溶液,用旋涡振荡器混匀10sec,1500rpm离心5min,弃上清;用PBS溶液重复洗涤一次;加1%多聚甲醛100μl,...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第9期登革病毒E蛋白抗原基因肌肉注射诱导小鼠免疫应答的初步研究
...胞数至106ml-1,分别加入FITC-CD3/PE-CD4和FITC-CD3/PE-CD8单抗,混匀后室温放置30min,用流式细胞仪计算CD3+CD4+T细胞亚群和CD3+CD8+T细胞亚群的百分率。 1.8 淋巴细胞转化试验 末次免疫后2w,随机取试验组和对照组小鼠各3只,取出脾...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学