Eag1钾离子通道在宫颈癌中的表达以及缺氧对其的调控
... 1.2.1细胞培养Hela细胞为本室培养的细胞株。使用含10%小牛血清的DMEM培养基,置于5%CO2、95%空气、37℃、饱和湿度的孵箱内培养。 1.2.2缺氧模型观察细胞70%~90%融合,在无菌条件下弃去大部分培养液。将混合气体(含90%N2、5%...
医源资料库;在线期刊;中华现代妇产科学杂志;2010年第7卷第4期抗HBsAg人IgG表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达
...HO细胞/200μ1无血清IMDM培养基中。37C培养3h后,补加含10%小牛血清的非选择培养液至1m1。次日吸出细胞上清,换入1m1非选择性培养基,48h后取上清检测IgG的瞬时表达。同时用有限稀释法在96孔板上进行转染细胞的克隆化培养,加...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学静脉注射大剂量免疫球蛋白治疗新生儿低氧缺血性脑病的近期效果
...,取上述细胞悬液200μL加入内有1.8mL含体积分数为0.10灭活小牛血清和20μgPHA的RPMI1640培养液之无菌培养瓶中,在37℃体积分数为0.05CO2条件下培养48h。③血浆和培养上清液中IL6、IL8、IL10测定:采用ELISA法。板内、板间变异系...
医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2006年第21卷第1期不同品系小鼠感染华支睾吸虫后IgG及亚类的动态观察
...浓度。4℃包被抗原(0.05mol/LpH9.5碳酸缓冲液)过夜;用1%小牛血清封闭,37℃,30min;加入稀释的小鼠血清,37℃孵育1h;再加稀释的HRP标记二抗,37℃1h。最后用二甲亚砜配置0.1mg/ml的TMB(3.3,5.5-四甲基联苯胺)进行显色反应,避光...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第5期人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注大鼠学习记忆及海马神经元Glu和NMDA受体亚单位表达的影响
...,DAB显色。阴性对照用一抗稀释液(含有体积分数0.01的小牛血清清蛋白、3g/LTriton×100+PBS)替代一抗孵育。 1.6Glu、NR1、NR2B免疫阳性神经元表达的检测从免疫组化反应切片中选取形态典型的对应切面,显微镜下观察,照相。所...
医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2006年第21卷第4期TNF-α诱导类风湿关节炎滑膜成纤维细胞MAPKs通路的活化
...ostar)中,生长至85%汇满时,弃去培养液,换用含0.3%BSA或1%小牛血清的DMEM培养液静息24h,分别加入TNF-α不同浓度梯度(1、10、100U/ml)作用5min,10U/mlTNF-α作用不同时间(1min、2min、5min、15min),预冷PBS冲洗细胞,立即加入100μl细胞裂解液...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学YY1蛋白对HPV16启动子P97的抑制效应依赖于上游的增强子序列
...pC-7463。 细胞培养及转染:子宫颈癌细胞系C33a在含10%小牛血清的DMEM培养液中生长。细胞转染采用磷酸钙法〔3〕,2μg质粒DNA,0.5μgpRSV-β-galDNA与250mmol/LCaCl2,1×HBS缓冲液(280mmol/LNaCl,10mmol/LKCl,1.5mmol/LNa2HPO4,50mmol/LHEPES)室温作用20min...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
...宜方法测定。 (三)其他原材料 1.细胞培养用小牛血清 支原体检测应为阴性。经小量试验适于杂交瘤细胞生长。 2.培养液 应有培养液来源,质量指标。 3.化学试剂 规格应达到分析纯以上。 二...
医药经济;生物技术;实验技术;生物工程下游技术第四节 ELISA的技术要点
...大肠杆菌提取的AP分子量为80kD,酶作用的最适pH为8.0;用小牛肠粘膜提取的AP分子量为100kD,最适pH为9.6。一般采用对硝基苯磷酸酯(p-nitrophenylphosphate,p-NPP)作为底物。它可制成片状试剂,使用方便。产物为黄色的对硝基酚,在4...
医源资料库;医源图书馆;教材类;免疫学和免疫学检验第五节 十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫
...迁延移行。Schad等曾用十二指肠钩虫丝状蚴人工感染兔、小牛、小羊、猪等动物,经26~34天后,在其肌肉内均能查出活的同期幼虫。提示,某些动物可作为十二指肠钩虫的转续宿主。人若生食这种肉类,也有受到感染的可能性。...
医源资料库;医源图书馆;教材类;人体寄生虫学