抗人C1q杂交瘤细胞中一未知DNA片段的克隆与分析

...模板的退火和延伸三步骤的循环反应，便可在数小时内将目的基因扩增百万倍，从而极大地减轻了实验室的工作强度。对整个PCR扩增体系，引物设计是最为关键的问题。本实验所用的一对通用引物分别与FR1、FR4互补，并引入了限...

基因诊断及其临床应用

...由于基因体外扩增技术的发展，待分析的标本只需微量，目的基因只需pg水平。（3）适应性强，检测范围广。由于基因探针的来源种类较广，其探针序列可为已知亦可为一类特定的基因组，可为内源性基因亦可为外源性基因，在...

2型糖尿病并脑梗死患者eNOS基因内含子4上a/b基因多态性的初步研究

...A快速提纯试剂盒(北京赛百盛公司提供)提取。　　122目的基因片段PCR扩增：引物参照Uwabo等［１］的设计，由北京赛百盛公司合成，序列为5ＧＧＧＡＡＣＣＴＣＡＧＣＣＣＡＧＴＡＧＴＧＡＡ３，５ＧＴＧＧＴ...

乌司他丁对脓毒症大鼠肺微血管通透性及肺组织PEDF表达的影响

...糖凝胶电泳后,用LabWork410UVP成像系统照相并分析结果。以目的基因与内参照在凝胶上的灰度值比值为基因表达的相对含量。大鼠PEDF序列(扩增片段为374bp):上游5‘-CCCCATGATGTCAGACCCTA-3‘,下游5‘-GGGGACTCAAACAAGGACTG-3‘,PCR反应条件:94℃2min...

Cad-Ⅱ基因转染的兔骨髓间充质干细胞自体移植术后的表达研究△

...与同一样本的β-actin条带的检测值相比得到的比值作为目的基因的相对表达量。1.2.6Cad-Ⅱ免疫组化染色4%多聚甲醛固定的标本脱钙包埋,连续切片(片厚5μm),按照免疫组化试剂盒说明进行Cad-Ⅱ免疫组化染色,以细胞胞浆内出现明...

As2O3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤抑制作用及机制

...caspase3及GDPH扩增标准曲线斜率分别为3.465及3.431，提示目的基因及管家基因进行PCR反应时扩增效率近乎相等，故可采用2-ΔΔCT法进行基因表达量的相对分析。规定NS组基因表达量为1，则得CBP组及低、中、高剂量As2O3组基因...

1990～1997年云南IDUsHIV-1B亚型分离株膜蛋白V3环顶端四肽基因序列的变化趋势

...状HIV-1感染者全血中提取前病毒DNA，进行HIV-1膜蛋白C2-V3区目的基因的套式PCR扩增，构建测序克隆。使用赛百盛公司737型DNA自动测序分析仪进行测序。有关的DNA序列测定结果已报道〔4-7〕。　　HIV-1分离株膜蛋白V3环顶端四肽基序...

间皮素mRNA与子宫内膜癌的相关性研究

...一步法RTPCR试剂盒（QIAGEN公司）说明书操作，直接合成目的基因产物。25μL反应体系含5×Buffer5μL，5×QSolution5μL，dNTPMix1μL,QIAGENOneStepRTPCREnzymeMix1μL,间皮素基因引物GAPDH引物0.6μmol/L，模板RNA2～5μL。RTPCR...

凋亡相关基因Survivin及Caspase3mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

...用SQ9636型扫描系统扫描，HPIAS1000图像分析系统检测各组目的基因及GAPDH基因(内参)的积分吸光度值，以二者的比值代表各组mRNA的表达量。　　1.3统计分析使用SPSS10.0软件包统计分析，实验组与对照组的比较采用χ2检验，各实验...

微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗的构建及鉴定

...和SalⅠ双酶切及1%琼脂糖凝胶电泳鉴定。　　2结果　　2.1目的基因的扩增以pET-30a-CP15/60-23质粒为模板，用引物P1和P2进行PCR扩增，扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳，在约790bp处见一特异扩增带,长度与CP15/60-23基因值（792bp）相符(图1)。...