NorthernBlot技术
... (三)试剂 NorthernMaxKit(Cat.#1940,Ambion,Inc.),琼脂糖,DEPC,X光底片,底片暗盒,RandomPrimer,dNTPMixture,111TBq/mmol[a-32P]dCTP,Exo-freeKlenowFragment和10XBuffer,SephadexG-50,SDS,双氧水,灭菌水等。 [方法与步骤] 1.用具的准备:...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术应用GelWorks软件定量分析PCR扩增产物
...片段,同时用不同剂量标准mRNA经逆转录及PCR扩增后,经琼脂糖凝胶电泳,以凝胶成像系统扫描成像,用GelWorks1D软件分析凝胶图像,绘制标准曲线,对样品进行定性与定量分析。结果在7例妊娠妇女中,6例扩增出ε/γ基因片段(274...
合作平台;在线期刊;中华中西医杂志;2004年第5卷第9期;论著康定冬虫夏草与人工虫草的RAPD指纹图谱比较研究
...(上海Sangon公司),EcoR-Ⅰ和HindⅢ分子量标准品(Prommiga公司),琼脂糖(Bio-Rad公司),其他为市售分析纯试剂。1.3 方法1.3.1 虫草DNA提取:取虫草粗粒干品约110g,用灭菌TES缓冲液浸泡4℃过夜。其中换液两次,去除部分可溶性色素。离心去上...
药品天地;专业药学;中药大全;中药指纹图谱免疫-PCR技术进展
...蛋白-Puc19复合物。(4)PCR扩增抗体所连接的Puc19。(5)琼脂糖凝胶电泳,EB显色检测Puc19. 运用这种方法,Sano等人可检测到600个BSA抗原分子。与用碱性磷酸酶作为标记物的ELISA方法相比,免疫-PCR的敏感度比ELISA高106。在这免疫...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学β3肾上腺能受体基因Trp64Arg多态性与心力衰竭的相关性研究
...30s,共进行30个循环,最后72℃延伸10min。扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,紫外灯下检测。1.2.4基因型的检测取6μlPCR产物,限制性内切酶MvaI(大连宝生物公司)6U,10×缓冲液1.5μl,灭菌的去离子双蒸水6.9μl,反应总体积15...
合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2005年第5卷第1期;论著Southern杂交
...法的优点是快速,在30分钟内就能从正常厚度(4-5mm)和正常琼脂糖浓度(1%)的凝胶中定量地转移出来。转移后得到的杂交信号比Southern转移强2-3倍。缺点是如不小心,会使凝胶碎裂,并且在洗膜不严格时,其背景比毛细转移要高。 1...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术肝细胞导向的促红细胞生成素基因转移在肾性贫血基因治疗的初步研究
...物中pDR2EPO质粒与半乳糖基化组蛋白的结合比例通过在0.8%琼脂糖凝胶电泳上的DNA阻滞试验确定。0.5μgpDR2-EPO质粒分别与不同量的半乳糖化组蛋白混匀于20μ10.15mol/L的NaC1溶液中,室温静止72小时,当质粒与半乳糖基化组蛋白比例合适...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学ACE与AT1R基因多态性及其相互作用对心衰预后的影响
...火56℃45s,延伸72℃2min,共扩增35个循环。扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,紫外摄影观测结果,可见PCR产物含有597bp基因片段为插入型基因(II),含有319bp基因片段为缺失型(DD),同时含597bp和319bp基因片段为ID型杂合子...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2005年第5卷第3期电离辐射诱发小鼠survivin和caspase-3基因的mRNA表达*
...育10min,置4℃结束反应。1.2.5图像分析各取PCR产物10μl,1%琼脂糖凝胶(含0.5%EB)60V电泳1h。采用Doc1000凝胶成像系统采集图像,用MolecularAnalysisTM软件对电泳条带进行密度扫描。survivin和caspase-3mRNA表达以该条带黑度占β-actin条带...
医源资料库;在线期刊;中华现代影像学杂志;2007年第4卷第2期PTEN基因参与介导孕三烯酮诱导的异位子宫内膜细胞凋亡
...基偶氮唑兰(MTT)比色法、透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况,应用Western免疫印记法,观察药物作用前后PTEN基因的表达变化。结果原代培养的子宫内膜异位症细胞经孕三烯酮处理后,细胞生长被...
合作平台;在线期刊;中华中西医杂志;2004年第5卷第15期;论著