双重PCR-毛细管电泳法快速检测大豆中转基因成分
...基因等外源基因,自行设计了两对引物,采用双重PCR同时扩增上述基因,用8g/L羟丙基甲基纤维素为筛分介质,在50cm×100μmi.d.涂壁毛细管中,于一10kV电压下用激光诱导荧光-毛细管电泳检测转基因大豆的PCR扩增产物。结果在...
药品天地;专业药学;中药大全;中药指纹图谱第四节 遗传病与肿瘤的基因诊断
...术由Mullis等首创(详见第二十二章 )。它又称为DNA体外扩增技术,是用DNA聚合酶在体外扩增一段DNA顺序达百万倍以上。这样就可直接观察而不用印迹杂交法。这项技术的基本原理是,将有待扩增的DNA分子加热变性成为单链,然...
医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸抗人TNF-α单抗基因的克隆及鉴定
...端引物:参照Morrison等人的设计〔1〕,合成一组自前导肽扩增VL和VH的PCR引物,其中扩增Vκ的有5个,扩增VH的有3个,均引入EcoRⅤ内切酶位点。3‘端引物:用于扩增Vκ的引物与Cκ及Vκ交界部位序列互补,引入SalⅠ内切酶位点;用...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学含前S基因的重组乙肝病毒表面抗原表达质粒的构建并在CHO细胞中表达
...粒,并在真核细胞CHO中表达该抗原。方法通过PCR方法分别扩增乙肝病毒表面抗原S和前S1及S2基因,利用引物的柔性短肽连接头,经第二次PCR扩增,获得可完整表达乙肝病毒表面抗原的融合基因。分别以pcDNA3和pSV2载体构建真核细胞...
合作平台;在线期刊;中华医药杂志;2004年第4卷第8期;论著微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗的构建及鉴定
...-23基因重组卡介苗。方法以pET-30a-CP15/60-23质粒为模板,PCR扩增CP15/60-23基因片段,然后克隆至TA载体;通过酶切、测序鉴定后,将CP15/60-23基因片段用限制性内切酶切下定向克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV262结核杆菌热...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第6期低温冻存脐血来源EBV-LMP2树突状细胞疫苗CD86与CD83的表达
...,经MACS分选人脐血CD34+干细胞,GM-CSF和TNF-α诱导14天分化扩增为DC,低温冻存,再用包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒感染DC制备EBV-LMP2-DC疫苗。倒置显微镜动态观察DC的形态,流式细胞仪检测EBV-LMP2-DC疫苗的CD86和CD83表型。结果CD34+细胞...
合作平台;在线期刊;中华医学实践杂志;2004年第3卷第9期;论著海南黎汉族高血压人群ACE基因多态性与危险因素研究
...CE-3:5’-TCGCCAGCCCTCCCATGCCCATAA-3’ ACE-1和ACE-3引物对扩增ACE基因中包括Alu插入片段的DNA区域,当样本是插入纯合子(Ⅱ型)时,PCR扩增将只出现一条533bp的DNA扩增片段,当样本是缺失纯合子(DD型)时,PCR扩增将只出现一条233bp的DN...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2007年第7卷第7期RT-PCR实验方法总结大全
...T-AdaptorPrimer;和c:特异的下游引物。如果用a和b方法,是扩增的所有的cDNA(理论上),还要用此产物做PCR的模板继续扩增。 如果用c方法,那么要去那里查它的序列呢?http://www.ncbi.nlm.nih.gov 问题: 在做RT-PCR遇到一...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术产ESBLs大肠埃希菌基因型分析
...s的大肠埃希菌47株,分别用TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果PCR扩增结果显示TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2和CTX-M-9的阳性率分别为59.57%、4.26%、17.02%、19.15%和82.98%...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第3期RFLP和RAPD技术
...饱和图谱是RFLP研究的主要目标之一。 运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(RandomamplifiedpolymorphicDNA,随机扩增的多态性DNA)。尽管RAPD技术诞生的时间很短,但由于其独特的检测DNA多态性的方式...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术