酶活性测定条件的选择和限定
...或选择测酶活性浓度方法时必须面对的问题。图8-15酶与底物的反应过程首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶与底物的反应过程如图8-15所示。酶的整个反应过程也可用下面的方程式表示:...
药品天地;专业药学;实验技术;生化实验;酶学实验第三节 酶活性测定条件的选择和限定
...多数条件下只存正比,即v∝[E]。而非正比例关系。但在底物[S]浓度很大,远远超过Km的特殊条件下Km值由于相对很小可忽略不计。此式可变为: 由于底物[S]浓度很大,使酶饱和。ES已达极限,反应速度不再增加,故此时反应...
医源资料库;医源图书馆;教材类;临床生物化学第二节 酶活性测定的常用技术和方法
...碱性磷酸酶的Bodansky法、King法等等。这些方法都是在酶和底物作用一段时间后停止酶反应,加入各种化学试剂与产物或基质反应呈色,用比色计在可见光处比色,同时将被测物质作标准管或标准曲线,比较后计算出在此段时间内...
医源资料库;医源图书馆;教材类;临床生物化学第三节 化学发光免疫测定
...测定分为二种类型。第一种是以发光剂作为酶免疫测定的底物,通过发光反应增强测定的敏感性;第二种是以发光剂作为抗体或抗原的标记物,直接通过发光反应检测标本中抗原或抗体的含量。 一、化学发光酶免疫测定 ...
医源资料库;医源图书馆;教材类;免疫学和免疫学检验ELISA操作要点
...在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更...
医药经济;生物技术;实验技术;免疫学实验技术ELISA实验要点
...在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。 加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学第二节 临床生化方法的建立
...最适pH,酶促反应中,只有在其最适pH时才能发挥充分的催化活性。因此,在建立方法时可在不同pH值条件下(其它条件不变)令其反应,以观察颜色反应的吸光度变化,从而选择合适的pH值范围来保证颜色反应,以求较高的灵敏...
医源资料库;医源图书馆;教材类;临床生物化学影响酶联免疫吸附试验检测结果的原因分析及应对措施
... 操作中,依次有3次加样,即加标本、加酶结合物、加底物。加标本一般采用手工加样或者加样器。手工加样每次必须更换吸嘴,以避免交叉感染。要掌握好并在实际操作中揣摩使用技巧,避免吸样量过多或过少。加样器在长...
医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2012年第12卷第4期酶联免疫吸附法检测瘦肉精
...抗标记酶,将其放入湿盒,置37摄氏度、30min。 1.4.4 加底物显色 取底物A、底物B按等体积混匀,在酶标板上每孔加200μL配好的底物显色板显色,显色后每孔加入50uL的终止液终止反应。在酶标仪上测定各标准样和各样品450nm处的光...
药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱分析实例第四节 ELISA的技术要点
...抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下叙述这些试剂的原料和制备方法。 (一)固相载体 可作ELISA中载体的物质很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或...
医源资料库;医源图书馆;教材类;免疫学和免疫学检验