PCR实用技巧
...有一些活性.所以在A.T.的时间过长,会极大的增加非特异性扩增的风险,另外,在对于一些困难户,比如从gDNA里扩增大片段,还可使用twostepPCR. 5.touchdownPCR 原理很简单,但的确是一个很有用的方法。举个例子,ANNEALINGTEMP.55度 ...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术PCR在突变基因检测时的应用
...出发生突变的基因,而且即使获得极微量的组织亦可经PCR扩增而进行中种检测,加上PCR技术与探针杂交技术,RFLP技术及PCR直接测序的结合,改换方法得以迅速发展和推广,大大的促进了遗传病及肿瘤有关的基因的研究进展. ...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术从四例丙肝患者系列血清标本分析HCV基因的变异
...对4例因献血感染HCV病人的系列血标本,用特异性引物PCR扩增检测,5′-NCR和核心区测序确定HCV基因型,并对标本膜区基因进行克隆,每个标本随机选择5~9个克隆进行测序分析。结果 发现随着时间推移,存在HCV基因型的转换现...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学小鼠MAdCAM-1分子剪切体的克隆及表达
...下游引物终止密码子由TGA改为大肠杆菌偏性密码子TAA,能扩增出编码成熟mMAdCAM-1分子剪切体多肽的cDNA序列。上游引物:5′CCGGATCCGGACAGTCCTTCCAGGTG3′;下游引物:5′AGGATCCTTATAGGTGTGTACATGAGCT3′利用异硫氰酸胍一步法〔7〕从BALB/c小鼠的肠...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学PCR和RT-PCR技术
...)过程利用模板变性,引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列。这是一个指数增长的过程,因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板,使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术。一般,经过20-30个循环得到的扩增产...
医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术难检DNA样品分型检测新进展
...样本(难检DNA样本)的STR分型仍是法医学DNA检验的难题。扩增前引物延伸(IPEP)、全基因组扩增和MiniSTR(在设计引物时,使其结合在更靠近核心重复序列的侧翼序列,PCR扩增的产物就会比STR基因座更短一些)等技术的应用,使难...
行业资讯;临床快报;遗传与基因组敌敌畏抗性淡色库蚊酯酶B1、A2探针制备及应用
...要机制,非特异性酯酶活性增高是由于酯酶结构基因大量扩增,相应地大量表达酯酶造成的[1]。多年来应用的WHO生物测定法检测抗性存在结果波动性大,重复性差,操作繁琐,需时长,在抗性水平低时难以测出抗性存在等缺...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2005年第5卷第2期丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌的相关性研究
...京医科大学肝病研究所生产的检测HCV的RT-PCR试剂盒,限制扩增长度为240bp;HBV-DNA检测采用华美生物工程公司生产的HBV试剂盒,限制扩增长度为270bp。 1.3方法 1.3.1核酸提取取3~5张10μm石蜡切片放入离心管内,用二甲苯脱蜡两...
合作平台;在线期刊;中华医学研究杂志;2004年第4卷第6期;论著23株灵芝栽培菌种的DNA指纹鉴别
...芝菌种的差异。从247个随机引物中筛选出具有较高多态性扩增检测能力的引物9条,对23株灵芝菌种进行RAPD分析。以其中的两条随机引物S17和S1005进行扩增分析可以有效鉴别大部分灵芝栽培菌种,作为分子标记。 【关键词】灵芝;...
医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第3期Kgla细胞免疫小鼠脾细胞scFv噬菌体展示文库的构建及其表达
...髓系白血病细胞系KGla细胞免疫小鼠,取其脾细胞,RT-PCR扩增VH和Vκ基因并克隆入噬菌体展示表达载体,构建scFv文库,并测定文库的库容量和BstN1酶切单个克隆分析文库的多样性。用KGla作为固相抗原,进行四轮吸附-洗脱-富集的筛...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学