人FasL分子的克隆、表达及多抗制备
...流行病研究所免疫室,北京 100850)关键词:FasL;融合蛋白;大肠杆菌表达;多克隆抗体 [摘 要] 目的 获得人FasL蛋白,并对其功能进行初步研究。方法 用DNA重组法构建了FasLcDNA和谷胱甘肽转硫酶融合原核表达质粒pG...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学多发性骨髓瘤特异APE1siRNA表达载体的构建及鉴定
...APE1siRNA表达载体pSilencerK-IE-IgP-APE1siRNA,观察其对MM细胞APE1蛋白表达的特异性敲除作用。研究者设计合成的APE1siRNAcDNA序列与线性化pSilencer2.0-U6母本质粒连接后,用BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切,插入IgP寡核苷酸片段;随后用EcoRⅠ酶切pSilence...
行业资讯;临床快报;肿瘤相关RNA干扰文库及其在功能基因组学研究中的应用
...与同源mRNA的特异配对,引导RISC特异地降解同源mRNA,导致基因表达的抑制。因此小片段的siRNA也可以诱导高效的基因沉默。 在线虫,注射或喂食dsRNA能引起特异基因在动物各器官的沉默,而且该抑制作用可以持续到第一代的...
行业资讯;临床快报;RNA研究人胰腺癌hedgehog信号转导途径中PTCH基因的克隆与鉴定
...)为了克隆人胰腺癌hedgehog信号通路中PTCH基因,构建PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达。研究者从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,经R-PCR扩增出PTCH基因,经纯化、回收目的基因PTCH,将其插入表达载体PET22b,转化E.coliBL21-CodonPlu...
行业资讯;临床快报;肿瘤相关靶向IGF-1R的siRNA表达载体的构建及其对肺癌细胞有促凋亡作用
...mRNA的表达量分别为(22.1±2.5)%和(80.1±3.9)%,蛋白的表达分别为(15.2±3.1)%和(47.1±4.1)%,组间差异具有统计学意义(P〈0.05)。pENTR/U6-shRNA-1转染组抑制了Akt的磷酸化,增加了3%乙醇诱导的细胞凋亡作...
行业资讯;临床快报;肿瘤相关老年性痴呆的基因治疗与神经生长因子
...因枪)等优点。但是直接导入的DNA通常难以整合入基因组,基因表达存在不稳定性,且在非分裂细胞中基因的转染效率不高,使其应用受到限制。(2)病毒载体介导途径即通过构建复制缺陷的重组病毒将靶基因引入体内。迄今为止,病毒...
医源资料库;在线期刊;中华医学研究杂志;2005年第5卷第10期第二节 基因工程载体
...每个质粒DNA上都有复制的起点,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制,不同质粒复制控制状况主要与复制起点的序列结构相关。有的质粒的可以整合到宿主细胞染色质DNA中,随宿主DNA复制,称为附加...
医源资料库;医源图书馆;教材类;生物化学与分子生物学抗人TNF-α单抗基因的克隆及鉴定
...活表明无抗体活性。另一个轻链和重链可变区基因的成熟蛋白编码部分与从第一骨架区引物所克隆的、可在大肠杆菌表达出抗体活性的Vκ、VH序列相符。将该轻链、重链基因分别克隆到了人-鼠嵌合轻链、重链表达载体中。结论 ...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学Kgla细胞免疫小鼠脾细胞scFv噬菌体展示文库的构建及其表达
...1]。该技术是将抗体可变区基因与单链丝状噬菌体衣壳蛋白基因融合,使scFv或Fab段可随衣壳蛋白一起呈示表达于噬菌体的表面,通过简便的吸附-洗脱-富集的筛选过程,而分离获得特异性抗体可变区基因的新技术。人髓系白血...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学竞争性PCR内参照菌的构建及应用
...试剂:限制性内切酶、T4DNA连接酶、RNA酶A、TaqDNA聚合酶、蛋白酶K、IPTG、X-Gal及PCR裂解缓冲液购自华美生物工程公司,dNTP为宝灵曼公司产品,85bpPCRMarker购自天象人公司,低熔点琼脂糖(DNA级)和脉冲场级琼脂糖为Bio-Rad实验室产...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学