携带Tip30和人IFN-γ基因的鼠减毒沙门菌的制备
...pCI-IFN、SL7207/pCI-tip30、SL7207/pCI-tip30/IFN和SL7207/pCI-neo(105个细菌),室温放置1h后以含50μg/ml庆大霉素的DMEM洗2遍,加同样培养基培养放置于37℃5%CO2细胞培养箱培养4h,改为以含50μg/ml庆大霉素和10μg/ml四环素的DMEM培养,48h后检测目...
合作平台;在线期刊;中华实用医药杂志;2004年第4卷第23期;论著人基因治疗研究和制剂质量控制技术指导原则
...接导入人体,包括病毒的与非病毒的方法。其制品形式是基因工程技术改造的病毒或者是重组DNA、或者是DNA复(混)合物。基因治疗制剂种类较多,因此,本指导原则不可能用一个模式来概括,只能提出一个共同的原则,具体的...
医药经济;生物技术;实验技术;生物工程下游技术HCV包膜蛋白的免疫与疫苗研究进展
...构建了只含HCV结构基因(即HCV/C、E1和E2)的杆状病毒表达质粒,在该质粒转染的相同,颗粒含有部分HCVrNA,说明没有非结构区,没有HCV本身的RNA聚合酶,同样可以完成病毒RNA的复制和病毒包装[14]。这就为体外获得具有天然构象...
合作平台;医学论文;基础医学论文;组织胚胎学抗菌药物耐药性的分子生物学机制
...产生耐药性,为人类战胜病原菌提出了一个严峻的挑战。细菌耐药的机制非常复杂,通常认为涉到以下几个方面:(1)产生灭活酶和钝化酶。细菌能产生可破坏抗生素或使之失去抗菌作用的酶,使药物在作用于菌体前即被破坏或...
合作平台;在线期刊;中华医药杂志;2004年第4卷第8期;综述应用PRPL串联启动子表达HIV-2gag蛋白
...表达奠定实验基础。 1 材料与方法 1.1 材料 质粒和菌株:E.coliDH5α和pCRTMII本室保存,pBV220质粒由张智清教授惠赠。工具酶:实验所用工具酶购自华美生物工程公司和Promega公司。生化试剂:溴化己锭(EB)和过硫酸铵等购...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学转基因植物及其安全性研究进展
...命科学成为了自然科学中的主导科学。生物技术的核心是基因工程技术,新的技术带来了巨大的科学发展及经济效益,同时也带来了新的棘手问题。随着转基因植物商品化速度的加快,社会公众对转基因植物及其产品的安全性或...
医药经济;生物技术;技术要闻人Ⅱ型免疫缺陷病毒gag基因在大肠杆菌中的表达
...gag基因;大肠杆菌;表达 摘 要 目的:表达HIV-2型基因工程gag抗原。方法:将编码HIV-2型gag的部分和全部p55gag1/2基因,克隆到载体pET-17b后,分别在E.ColiBL21(DE3)中表达。结果:表达产物为51和61kD融合蛋白,并可与HIV-2病人血...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学竞争性PCR内参照菌的构建及应用
...P2:5′-TGCGCCACTAAGATGTCAAG-3′,由中国科学院微生物研究所基因工程中心合成,其余试剂均为分析纯。 DNA重组操作:质粒DNA的制备(碱裂解法)、质粒转化(氯化钙转化程序)、含重组质粒的细菌菌落的鉴定、DNA限制性内切酶...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因的克隆和表达
...NA,Sanger双脱氧链终止法测定其序列,与pBV220载体构建重组质粒,在大肠杆菌中表达,SDS-PAGE和Westernblot分析重组蛋白。结果 用RT-PCR方法扩增得到了HCV丝氨酸蛋白酶基因,序列分析表明其读码框架正确,丝氨酸蛋白酶活性中心高...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学副粘病毒融合蛋白分子上特异性细胞融合作用位点的初步确定
...物转化大肠杆菌MV1190。 (4)挑选突变株:从转化的细菌菌落中随机挑选若干进一步扩增,提取质粒DNA,酶切反应初步鉴别突变株,然后进行DNA序列分析,进一步确定突变株。 (5)DNA序列分析:采用双脱氧末端法,按照B...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学