人白细胞介素-3突变体的构建及在大肠杆菌中表达的研究
...rGTAACCAGATAGAACGTCAG由上海细胞所合成。 1.4 目的基因的扩增 1.4.1 天然hIL-3基因的扩增 primerA与primerB分别为上游和下游引物,模板pBVhIL-3,PCR反应体系为100μl,95℃变性10min后加Tag酶0.5U,然后按94℃,0.5min;65℃0.5min;72℃2min...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学第四军医大学西京医院研究证明:EPCS具有促血管生成的作用
...般来说,人脐血及外周血中的EPCS数量仍非常少,经体外扩增后,平均100毫升外周血大约可分离、扩增到5.0×106个EPCS,如果应用于人体,需要的细胞量较大,而且EPCS体外扩增较困难。因此,EPCS的临床应用尚需进一步的研究。 (...
医学教育;科教新闻第五节 HLA分型技术
...ction)技术已被用于RFLP分析,即用等位特异限制酶裂解PCR扩增的片段,然后再进行分析,从而大提高了灵敏度。 (二)PCR/SSO技术 此法乃用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待检细胞经PCR扩增的HLA基因...
医源资料库;医源图书馆;教材类;医学免疫学第二十二章 聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用--第一节 概述
...a”cloningtechnique),是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。该方法一改传统分子克隆技术的模式,不通过活细胞,操作简便,在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增107~108倍,大大提高了DNA的得率...
医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸BPDE诱发16HBE恶性转化过程中eIF3p36的表达变化
...quo;,荧光探针:5’-FAM-CATgTggTCCTgggCggTggT-TAMARA-3’,扩增产物cDNA长度为65bp。 1.2.2eIF3p36mRNA逆转录合成cDNA采用中山达安基因公司自制逆转录试剂盒,在PE9600PCR仪按下列条件进行逆转录,反应条件为37℃1h,95℃3min,逆转录合成c...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第9期β3-肾上腺素能受体及UCP2基因多态性与儿童单纯性肥胖的关系
...CCATCACC。反应体系:以1μLDNA为模板在总反应体积20μL内行PCR扩增,扩增产物为210bp,用2%琼脂糖凝胶90V电泳30min。PCR反应条件为:94℃预变性5min,94℃变性30s,68℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环,最后72℃进一步延伸10min。在10μL酶...
医源资料库;在线期刊;中国学校卫生;2007年第27卷第3期神经酰胺介导粒细胞凋亡机理初探①
...国Dr.W.Dirks惠赠。流式细胞仪为美国B-D公司FACSCalibur,基因扩增仪为Biotechs公司HS-97型。 1.2 人外周血PMA分离 取健康献血者抗凝血,按常规方法立即进行PMA分离。 1.3 细胞培养 1×106ml-1HL-60细胞及分离的人外周血PMA,基础培...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学应用珠蛋白启动子驱动荧光蛋白在K562细胞中表达
...公司,GFP和RFP载体由山东大学崔行教授惠赠。1.2启动子的扩增从人的基因组DNA中扩增β珠蛋白启动子,引物序列正向:5′-ATTCAAACTTCCGCAGAACACT-3′,反向:5′-GGCAGTAACGGCAGACTTCTCCTCA-3′;PCR反应条件为:94℃3min,1个循环...
医源资料库;在线期刊;滨州医学院学报;2008年第31卷第1期定量测定IL-4和IFN-γmRNA的RT-竞争PCR法及其应用
...离液(上海试剂二厂),RNA/DNAcalculator(PhamaciaBiotech公司),DNA扩增仪(minicycletMJ-150Reserch公司),图像处理系统(SX-100imagesystem,上海四星生物技术有限公司)。引物1~6依据文献〔4〕的原理由计算机辅助设计,引物7、8按文献〔5〕,合成...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学HBV-DNA荧光定量PCR检测的室内质控研究
...乙肝-DNA荧光定量室内质控即刻法质控图随着《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》的贯彻实施,全国各地陆续规范地开展荧光定量PCR检测技术,与常规PCR技术相比,实时荧光定量PCR...
医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第7期