第三节 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用
...甲醛(PBS新鲜配制):室温20min。 (7)PBS/5mmol/lMgCl2漂洗10min×2。 (8)脱水,自低浓度到高浓度,无水乙醇各3min,空气干燥。 2.预杂交封闭非特异性杂交位点,20μl/每张切片,42℃水浴半小时。 3.杂交10~20μl/...
医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸丙型肝炎病毒体外感染原代人胎肝细胞的研究
...片:用镊子从培养板中取出细胞爬片,立即用0.01mol/L的PBS漂洗3次,每次30s。然后用4%多聚甲醛固定15min,再用PBS漂洗3次,置于-20℃保存,备免疫组化检测细胞内的HCV抗原表达或用原位杂交对细胞内的HCVrNA进行定位。 细胞及培...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学第二节 原位分子杂交技术在电镜水平的应用
...交过程须注意防止镍网上的杂交液干掉。 7.杂交后漂洗 含50%甲酰胺的2×SSC液 37℃ 30min 含50%甲酰胺的1×SSC液室温30min 无甲酰胺的1×SSC液室温20min 样品置1×SSc 4℃过夜 0.01mol/LPBS(pH7.2)室...
医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸雷公藤甲素对诱导CD4+、CD8+T细胞凋亡的作用
...抗人CD4或CD8单克隆抗体1μl,置冰上反应40min。用1×Hanks液漂洗两次后用RPMI1640液重悬细胞,以1×108细胞加入补体(新鲜豚鼠血清)1ml,37°C,5%CO2孵箱中反应45min。用1×Hanks液充分漂洗后用RPMI1640液重悬,并以每孔1×105细胞培养于96孔...
合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学核因子-kappaB的实验研究
...1.1抽提核蛋白[5]药物作用细胞1h后收集细胞,预冷的PBS漂洗2次,以BufferA(10mMHepes,pH7.9,10mMKCl,0.1mMEDTA,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.5mMPMSF)重悬,10min后加入l0%NP40至终浓度0.6%,混匀后l2000rpm4℃离心20s,弃上清,以BufferB(20mMHepes,pH7.9...
合作平台;在线期刊;中华实用医药杂志;2005年第5卷第10期;药品检验第二节 cRNA探针在原位杂交组织化学
...可与组织产生较高的非特异性结合,但此缺陷可在杂交后漂洗液中加用酶漂洗来解决。最近,Wolf等(1987)建议插入确定长度的寡核苷酸至载体内产生cRNA分子,这种cRBA分子称为“寡核苷酸核酸探针”(oligoribo-probes)已被成功...
医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸酶免疫电镜操作步骤
...的双面刀片切成50~100µm的薄组织再行固定1h~2h。3.漂洗以PBS液漂洗过夜,换液3~4次。4.血清孵育,25℃1h或4℃过夜,孵育的标本放置于加盖的瓷盘内,底层垫数层纱布。防止抗血清干燥凝固,不易洗脱,造成非特异性吸...
医药经济;生物技术;实验技术;免疫学实验技术离体脊髓星形胶质细胞的纯化与鉴定
...瓶后,在37℃、280r/min摇18h,倒去培养液并用新鲜培养液漂洗3次,将所得纯化星形胶质细胞用二次酶消化法传代,用含血清(10%)培养液将细胞密度调至1×106/mL,种植到培养皿中的盖玻片上(用作免疫组化鉴定)和培养瓶内...
医源资料库;在线期刊;局解手术学杂志;2008年第17卷第1期组织染色后封片技巧
...显色后,入蒸馏水洗3次。如是漂片染色,应在用蒸馏水漂洗后才将其裱在粘附剂处理过的载玻片上。对生长在盖玻片上的培养细胞,实验过程是在培养板内完成的,终止显色后,盖玻片用蒸馏水漂洗,洗后尽量吸出水份。经漂...
医源资料库;在线期刊;局解手术学杂志;2004年第13卷第4期庆大霉素对内侧橄榄耳蜗传出神经毒性作用的形态学观察
...,室温下行组化染色。首先经0.1%H2O2处理30min,0.1mol/LPBS漂洗,后用1%TritonX-100处理1h,0.1mol/L马来酸缓冲液(pH6.0)漂洗,再置组化反应液(含35μmol/L碘代乙酰硫化胆碱、5μmol/LK3Fe(CN)6、30μmol/LCuSO4、50μmol/L枸橼酸钠)中作用50min,经5...
合作平台;医学论文;基础医学论文;组织胚胎学