3 检查名称
7 操作方法
(1)按常规方法采集血清或用口径1.2cm的玻(铁)管的管口在滤纸上压出圆形印迹。从受检者耳或手指取血并加满圆圈,其血量约为20μl(约相当血清10μl),编号后阴干,放入有干燥剂的密封塑料袋内,运送至实验室,4℃可保存半年,-20℃可保存2年。检测时将干血滴剪下后放入反应板凹孔中,加0.01mol/L磷酸盐缓冲液0.2ml(pH值7.2),4℃浸泡过夜即成相当于1∶20的血清稀释液。
(2)从冰箱中取出抗原血片,立即用电风扇吹干,用特种蜡笔将每张抗原片划分成若干小格,每小格试1个标本或1个滴度,每格加血清1滴。每批试验均需设阴、阳性参考血清和PBS空白对照。加血清后立即移入湿盒,37℃温育30min后,用0.01mol/L PBS(pH值7.2)缓慢冲洗后放入有PBS的缸内浸泡5~10min。
(3)逐格滴加用0.01mol/L PBS(pH值7.2)稀释成1∶10的抗人IgG荧光抗体,置湿盒内37℃30min,同法洗涤后,每小格中加甘油和PBS等量混合液或蒸馏水,覆以盖片,于荧光显微镜下镜检反应结果。
(4)结果判读:以裂殖体和大滋养体胞浆的荧光强度和结构清晰程度区分,无荧光为(-),荧光微弱、形态结构不清为(±),荧光较弱、形态结构尚清楚为(+),另外根据荧光明亮度和结构清晰度的增加依次分为(2+)~(4+)。
8 正常值
阴性<1∶20。