1 拼音
huà zhuāng pǐn zhōng guò yǎng huà qīng de jiǎn cè fāng fǎ
《化妆品中过氧化氢的检测方法》由国家食品药品监督管理局于2012年1月18日国食药监保化[2012]13号发布。
3 2 方法提要
试样采用水浸提,部分上清液与三苯基膦衍生反应,衍生溶液经滤膜过滤,用液相色谱分离,紫外检测器检测,峰面积定量,以标准曲线法计算含量,得到样品中过氧化氢的含量。本方法对过氧化氢的检出限为0.0012μg,定量下限为0.004μg。若取0.2g样品,过氧化氢的最低检出浓度为60μg /g,最低定量浓度为200μg /g 。
4 3 试剂和溶液
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为一级实验用水。
3.1 乙腈,色谱纯。
3.2 三苯基膦溶液,称取三苯基膦1.3g,用乙腈(3.1)溶解,定容至25mL,浓度为0.2mol/L,现用现配。
3.3 氧化三苯基膦溶液,称取氧化三苯基膦0.0003g,用乙腈(3.1)溶解,定容至100mL,浓度为0.00001mol/L。
3.4 过氧化氢,浓度为3%,使用前需要进行标定,标定方法见附录。
3.5 过氧化氢标准储备液:称取标定过的过氧化氢对照品(3.4)1.5g,精确到0.0001g,置于25 mL棕色容量瓶中,用水定容,摇匀,配制成质量浓度为1.8mg/mL的标准储备溶液。
3.6 过氧化氢标准工作液:配制浓度分别为3.6mg/L、9.0 mg/L、18mg/L、36mg/L、54 mg/L、90 mg/L、180 mg/L的标准工作液。
6 5 分析步骤
5.1 样液的制备
5.1.1 样品前处理
称取样品约0.05g~0.2g(精确至0.001g),含过氧化氢3%以下称取0.2g,含过氧化氢3%~6%称取0.1g,含过氧化氢6%~12%称取0.05g,置于100mL容量瓶中,加入约50 mL水,振摇至样品完全溶解,用水定容,摇匀备用。面膜等半固体样品可以称取样品于50mL烧杯,加入约20mL,用玻璃棒将样品搅碎,用水转移至100mL容量瓶中,定容,摇匀备用。
分别移取过氧化氢标准工作液(3.6)和样液(5.1.1)各1mL于10mL棕色容量瓶中,加入1mL三苯基膦乙腈溶液(3.2),振摇,继续加入5mL乙腈(3.1),振摇,用水定容,摇匀。置于暗处室温反应30min。
5.2 测定
5.2.1 色谱参考条件
色谱柱:C18色谱柱,4.6mm ×250 mm,5 mm;
流动相:乙腈+水(60+40)(体积比);
流速:1.0mL/min;
检测波长:225nm;
进样量:10mL。
5.2.2 标准曲线的绘制
吸取10mL氧化三苯基膦溶液(3.3),注入高效液相色谱仪,确定氧化三苯基膦的保留时间。衍生化反应结束后,立即开始色谱分析,分别吸取10mL过氧化氢标准工作液衍生液(5.1.2)注入高效液相色谱仪,2h内完成上机分析。在上述色谱条件下测定其峰面积,记录氧化三苯基膦的峰面积,以标准溶液浓度为横坐标、氧化三苯基膦的峰面积为纵坐标,绘制标准工作曲线。
衍生化反应结束后,立即开始色谱分析,吸取10mL样液(5.1.2)注入高效液相色谱仪,2h内完成上机分析。在上述色谱条件下测定其峰面积。利用回归方程式计算样液中过氧化氢的浓度。
5.3 平行实验
10 附录:过氧化氢含量的标定方法
10.1 1 范围
10.2 2 过氧化氢含量的测定原理
H2O2分子中含有一个过氧键—O—O—,既可在一定条件下作为氧化剂,又可在一定条件下作为还原剂。在稀H2SO4介质中,室温条件下KMnO4可将H2O2定量氧化,反应方程式为:
5H2O2+ 2MnO4-+6H+=2Mn2++ 5O2+ 8H2O
该反应开始时速度较慢,滴入第一滴后溶液不易褪色,随着反应的进行,生成的Mn2+对反应有催化作用,反应速度加快,故能顺利滴定,当滴定到溶液中有稍过量的MnO4-后,溶液出现微红色显示终点,通过消耗KMnO4溶液的浓度和体积,可以计算过氧化氢的含量。
10.3 3 试剂和溶液
3.1 硫酸溶液,取10mL浓硫酸缓慢加入150mL水中,摇匀,备用。
称量1.0g固体KMnO4,置于大烧杯中,加水至300mL(由于要煮沸使水蒸发,可适当多加些水),煮沸约1小时,静置冷却后用微孔玻璃漏斗或玻璃棉漏斗过滤,滤液装入棕色细口瓶中,贴上标签,一周后标定。保存备用。
准确称取0.13~0.16g基准物质Na2C2O4三份,分别置于250mL的锥形瓶中,加约30mL水和3mol·L-1H2SO410mL,盖上表面皿,在石棉铁丝网上慢慢加热到70~80℃(刚开始冒蒸气的温度),趁热用高锰酸钾溶液滴定。开始滴定时反应速度慢,待溶液中产生了Mn2+后,滴定速度可适当加快,直到溶液呈现微红色并持续半分钟不褪色即终点。根据Na2C2O4的质量和消耗KMnO4溶液的体积计算KMnO4浓度。用同样方法滴定其他二份Na2C2O4溶液,相对平均偏差应在0.2%以内。
10.4 4 仪器和设备
4.1 酸式滴定管,50mL。
10.5 5 实验步骤
称取 0.3g过氧化氢,精确值0.0001g,置于250mL锥形瓶中,加入20~30mL水,振摇,加入100mLH2SO4溶液,振摇,用KMnO4标准溶液[c(1/5KMnO4)=0.1mol/L]滴定至微红色,半分钟内不退色为终点。记录消耗KMnO4溶液的体积,平行测定3次,极差应小于0.1mL,根据KMnO4标准溶液浓度和消耗的体积,计算过氧化氢的含量。
10.6 6 计算公式
过氧化氢质量分数按下式计算:
式中:w—— 过氧化氢的质量分数,%;