6 准备
留取待检标本。
7 方法
7.1 1.尿液尿卟啉检查法
(1)取新鲜尿4ml于试管中,加10滴冰乙酸混合。
(2)加入1ml戊醇,并振摇试管数次,待分层。
(3)在暗室中,用滤过紫外线灯观察戊醇层(上层),灰蓝色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
7.2 2.尿液粪卟啉检查法
(1)取新鲜尿液20ml放于试管中,加冰乙醇0.5ml和3%过氧化化氢2~3滴。
(2)再加入4ml乙醚,振摇试管数次,待分层。
(3)在暗室中,用滤过紫外线灯观察乙醚层(上层),灰白或蓝绿色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
7.3 3.尿液卟胆原检查法
(1)取新鲜尿液2ml放于试管中,加2ml对二甲氨基苯甲醛,静置3min。
(2)加饱和醋酸钠溶液4ml,混合后加氯仿3ml,充分振摇,待分层。
7.4 4.粪便卟啉的检查法
(1)取一小块粪便(约0.5g)放于试管中,加冰乙酸0.5ml,用玻璃棒搅成糊状。
(2)加4ml乙醚,再搅拌充分,静置。
(3)将上层清液(醋酸醚层)轻轻倒入另一试管中,加1.5mol/L盐酸2ml,充分振摇,待分层。
(4)在暗室中,用滤过紫外线灯观察下层(酸层),灰白或灰蓝色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
7.5 5.红细胞中卟啉检查法
(1)在试管中加混合试剂(乙醚∶冰乙酸=4∶1)5ml和末梢血4滴(0.2ml),用玻璃棒将小凝块搅碎。
(2)取上清液加入另一试管中,加3mol/L盐酸1ml,振摇数次,待分层。
(3)在暗室中,用滤过紫外线灯观察下层(酸层),无色为阴性,粉红或红色荧光为阳性。
7.6 6.红细胞中卟啉的荧光镜计数法
(1)试管中放1ml生理盐水,加末梢血2滴,摇匀后滴在玻片上(玻片上刻有小方格)。
(2)在荧光显微镜下计数小方格内发亮红色荧光的红细胞,再在普通显微镜下计数红细胞总数,计算出荧光红细胞的百分比。正常人荧光红细胞无或偶见(<1%),若>5%为异常。